玉米赤霉烯酮降解菌的筛选鉴定及其相关特性的研究

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玉米赤霉烯酮(Zearalenone,ZEN)是由多种镰刀菌产生的一种次级代谢产物,是一种污染情况严重的霉菌毒素。ZEN会污染谷物、动物饲料和人类食品,造成巨大的经济损失,还会对动物和人类的健康构成威胁。ZEN等这类真菌毒素的污染问题已经引起了人们的高度重视。目前主要利用物理、化学和生物脱毒法来处理毒素,其中利用微生物降解毒素的生物脱毒法有着其它方法难以取代的优势,逐渐成为研究热点。本研究的目的是筛选出具有降解ZEN能力的菌株,对菌株进行鉴定,并对其相关特性进行研究。本研究首先利用了传统方法,以ZEN为唯一碳源进行菌株的筛选,该方法共筛选到24株降解菌,分属于细菌域2门13属。同时,建立基于Biolog微平板技术的筛选模型,利用Biolog Eco板中多种碳源为筛选培养基,以ZEN的结构类似物苯酚为筛选压力,进行菌株的筛选。该方法共筛选到72株苯酚耐受菌,其中45株对苯酚有降解作用,通过进一步筛选,有24株对ZEN有降解作用,这24株菌分属于3门7属。在得到的降解菌株中,菌株WLB-29对ZEN表现出了最高的降解能力,试验对ZEN降解菌WLB-29进行了研究。经菌株形态观察和16S rDNA序列系统发育树分析,该菌株为Stappia属,其与模式菌株Stappia indica B106~T相似度为97.47%,初步确定其为潜在新种。试验还对菌株WLB-29对ZEN的降解特性进行了研究,结果表明WLB-29降解ZEN的最适合培养基、最适温度、最佳pH值、菌液接种量、ZEN浓度分别为LB培养基、37℃、8.0、2%和10μg/mL,培养144 h后,降解率达到92.56%。试验对一株苯酚高效降解菌也进行了研究。耐盐菌株YZZ-9对苯酚显示出了极高的降解能力,经菌株形态观察和16S rDNA序列系统发育树分析,该菌株为Kocuria palustris菌。经检测,该菌株在1.0 g/L苯酚浓度下,培养120 h后,几乎可完全降解苯酚,在苯酚浓度达到1.25 g/L时,该菌株仍然保有24.4%的降解能力。菌株对ZEN的降解率可达68.9%,证明了基于Biolog技术建立的筛选模型的可行性。以上研究结果,为ZEN的生物降解提供了新的菌种资源,具有广阔的应用前景,也为类似降解菌的筛选提供了新的筛选思路,为筛选模型的建立奠定了基础。
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