目的:乳腺癌是全球女性最常见的恶性肿瘤之一,其确切的发病机理仍未完全阐明。Copine1(CPNE1)是一种高度保守的钙依赖性磷脂结合蛋白，具有调节信号转导和膜转运的功能，参与多种肿瘤的发生发展过程(包括非小细胞肺癌、骨肉瘤、前列腺癌及肝癌)，但其与乳腺癌的相关研究甚少。本项目通过研究CPNE1对乳腺癌细胞增殖和迁移能力的影响及其可能的作用机制，为理解乳腺癌的分子生物学改变及个体化分子靶向治疗提供新的思路。
　　方法：1、应用数据库分析方法和免疫组化技术研究CPNE1在乳腺癌组织和正常乳腺组织(或非肿瘤良性病变)中的表达差异及其与临床病理指标的相关性。2、应用Westernblot技术及PCR技术检测乳腺癌细胞(MCF-7、MDA-MB-231和HCC1937)中CPNE1的本底表达量并构建特异性针对CPNE1基因的小干扰RNA慢病毒载体，建立CPNE1低表达模型，检测下调CPNE1的表达对乳腺癌细胞生物学功能的影响。3、应用MTT实验，Brdu实验，克隆形成实验等方法，检测CPNE1表达下调组中细胞增殖能力的改变。4、应用流式细胞术检测CPNE1表达下调对细胞周期和细胞凋亡的影响。5、应用细胞划痕实验和transwell实验检测CPNE1表达下调组中细胞迁移和侵袭能力的改变。6、应用Westernblot检测CPNE1表达下调组中相关蛋白的表达，探讨CPNE1影响乳腺癌细胞生物学功能的可能机制。
　　结果：1、TCGA数据库分析与免疫组化结果均提示乳腺癌组织中CPNE1表达高于正常乳腺组织(或非肿瘤良性组织)，但CPEN1表达与肿瘤大小(T)、淋巴结转移(N)、远处转移(M)、TNM分期及分化程度等病理指标无关。2、乳腺癌MDA-MB-231、HCC1937细胞中CPNE1蛋白及mRNA表达水平均较高，细胞经shRNA感染后，与对照组相比，CPNE1在蛋白及mRNA水平上表达明显受到抑制。3、下调CPNE1的表达可使乳腺癌细胞增殖能力和克隆形成能力显著下降。
　　4、下调CPNE1的表达可增加乳腺癌细胞的凋亡率，还可使其中的MDA-MB-231细胞周期阻滞于G1期。5、CPNE1表达下调可降低乳腺癌细胞的迁移和侵袭能力。6、沉默乳腺癌细胞中CPNE1可下调p-AKT和上调TP53的基因表达，这提示CPNE1或许与上述信号通路存在相互作用。
　　结论：1、CPNE1在乳腺癌组织中的表达明显高于正常乳腺组织(或非肿瘤良性病变)；2、内源性CPNE1可增加乳腺癌的细胞增殖能力及迁移和侵袭能力；3、CPNE1的功能可能与AKT和TP53等信号通路有关。综上所述，CPNE1基因与乳腺癌的发展有一定关系，并可能成为乳腺癌的潜在治疗靶点。