论文部分内容阅读
目的:除了源于三叉神经节的感觉神经末梢,大鼠眼前房(anterior chamber,AC)内还存在丰富的自主神经(包括交感神经和副交感神经)末梢,既往研究表明AC内三叉神经末梢可能在眼压(intraocular pressure,IOP)的神经性调节环路中发挥IOP感受器的作用,而自主神经可能充当传出神经,调节房水的生成和流出,IOP神经性调节中枢可能存在于下丘脑。本研究旨在探明是否存在从下丘脑核团到AC内自主神经末梢的传出神经通路。
方法:本研究通过向Sprague-Dawley(SD)大鼠AC内注射逆向跨多突触的神经环路示踪工具伪狂犬病毒(pseudorabies virus,PRV)的方法来标记支配AC的自主神经传出通路。将15只SD大鼠均分为3组,第1组大鼠(n=5)右眼AC注入非跨突触的神经示踪剂FASTDil作为对照;第2组大鼠(n=5)仅右眼AC注入PRV531;第3组大鼠(n=5)的右眼AC注入表达绿色荧光蛋白的PRV(PRV531),左眼AC注入表达红色荧光蛋白的PRV(PRV724)。AC注射FASTDil的大鼠存活7天,PRV注射的动物存活4.5天后处死,灌注固定后取双侧自主神经节,包括颈上交感神经节(superior cervical ganglia,SCG),翼腭神经节(pterygopalatine ganglia,PPG)和睫状神经节(ciliary ganglion,CG),以及脑组织,制作冰冻切片,进行免疫组化染色后用玻片扫描仪和共焦显微镜观察大鼠双侧自主神经节和下丘脑被PRV感染的情况。
结果:对照组大鼠仅能在FASTDiI注射眼同侧的自主神经节(包括SCG,PPG和CG)观察到FASTDiI(红色)标记的神经元,下丘脑未观察到红色荧光标记神经元。仅右眼AC注射PRV531的实验组大鼠,在右侧自主神经节(包括SCG,PPG和CG)观察到PRV531(绿色)标记神经元,在双侧下丘脑观察到对称性分布的绿色荧光标记神经元,荧光浓聚的核团包括:视交叉上核(suprachiasmatic nucleus,SCN),室旁核(paraventricular nucleus,PVN),背内侧核(dorsomedial hypothalamus,DMH),穹窿周区(perifornical hypothalamus,PeF),腹侧乳头体核(ventral mammillary nucleus,VTM)。双眼AC分别注射PRV531(右眼)和PRV724(左眼)的大鼠,在右侧自主神经节(包括SCG,PPG和CG)观察到PRV531(绿色)标记神经元,在左侧自主神经节(包括SCG,PPG和CG)观察到PRV724(红色)标记神经元;在上述双侧下丘脑核团可见PRV531(绿色)、PRV724(红色)荧光标记的神经元以及共标(黄色)神经元浓聚。
结论:我们的结果表明存在从下丘脑到AC自主神经末梢的传出神经通路,为下丘脑调节IOP提供解剖学证据;双侧下丘脑核团内的部分神经元与双眼AC内的自主神经末梢存在交互性传出神经通路,为眼压同感反应(consensual ophthalmotonic reaction,COR)现象提供了合理的解释。
方法:本研究通过向Sprague-Dawley(SD)大鼠AC内注射逆向跨多突触的神经环路示踪工具伪狂犬病毒(pseudorabies virus,PRV)的方法来标记支配AC的自主神经传出通路。将15只SD大鼠均分为3组,第1组大鼠(n=5)右眼AC注入非跨突触的神经示踪剂FASTDil作为对照;第2组大鼠(n=5)仅右眼AC注入PRV531;第3组大鼠(n=5)的右眼AC注入表达绿色荧光蛋白的PRV(PRV531),左眼AC注入表达红色荧光蛋白的PRV(PRV724)。AC注射FASTDil的大鼠存活7天,PRV注射的动物存活4.5天后处死,灌注固定后取双侧自主神经节,包括颈上交感神经节(superior cervical ganglia,SCG),翼腭神经节(pterygopalatine ganglia,PPG)和睫状神经节(ciliary ganglion,CG),以及脑组织,制作冰冻切片,进行免疫组化染色后用玻片扫描仪和共焦显微镜观察大鼠双侧自主神经节和下丘脑被PRV感染的情况。
结果:对照组大鼠仅能在FASTDiI注射眼同侧的自主神经节(包括SCG,PPG和CG)观察到FASTDiI(红色)标记的神经元,下丘脑未观察到红色荧光标记神经元。仅右眼AC注射PRV531的实验组大鼠,在右侧自主神经节(包括SCG,PPG和CG)观察到PRV531(绿色)标记神经元,在双侧下丘脑观察到对称性分布的绿色荧光标记神经元,荧光浓聚的核团包括:视交叉上核(suprachiasmatic nucleus,SCN),室旁核(paraventricular nucleus,PVN),背内侧核(dorsomedial hypothalamus,DMH),穹窿周区(perifornical hypothalamus,PeF),腹侧乳头体核(ventral mammillary nucleus,VTM)。双眼AC分别注射PRV531(右眼)和PRV724(左眼)的大鼠,在右侧自主神经节(包括SCG,PPG和CG)观察到PRV531(绿色)标记神经元,在左侧自主神经节(包括SCG,PPG和CG)观察到PRV724(红色)标记神经元;在上述双侧下丘脑核团可见PRV531(绿色)、PRV724(红色)荧光标记的神经元以及共标(黄色)神经元浓聚。
结论:我们的结果表明存在从下丘脑到AC自主神经末梢的传出神经通路,为下丘脑调节IOP提供解剖学证据;双侧下丘脑核团内的部分神经元与双眼AC内的自主神经末梢存在交互性传出神经通路,为眼压同感反应(consensual ophthalmotonic reaction,COR)现象提供了合理的解释。