目的：探究角膜缘微环境细胞向角膜基质细胞分化以及通过向角膜基质注射细胞悬液增加细胞数量的可行性和影响因素。
　　方法：取同济医院眼库来源的角膜移植术后供体角膜环，年龄18-60岁，采用胶原酶A消化分离角膜缘微环境细胞(LNC)和角膜基质细胞，在基质胶上培养，倒置像差显微镜拍摄细胞形态变化。选取第3-5代细胞制作细胞甩片，进行角膜基质细胞特征性标志物(Lumican、Keratocan、ALDA1A1)和Laminin免疫荧光染色和荧光强度对比。将Dil染色的LNC和角膜基质细胞通过胰岛素针注射入家兔角膜基质层，用活体荧光显微镜拍摄兔眼细胞移植后即刻、移植2周和移植4周红色荧光进行追踪观察。移植2周和移植4周家兔处死取眼球采用石蜡包埋，于Dil荧光部位切片，进行HE染色。移植4周的家兔眼球切片行Lumican免疫荧光染色，对Dil标记阳性的区域拍照。
　　结果：角膜基质细胞可在基质胶包被的培养板上贴壁生长，初期部分细胞保持原有树突状形态，随着细胞增殖角膜基质细胞拉长逐渐向成梭形形态转变。在细胞甩片免疫荧光染色中，LNC和角膜基质细胞均表达4种标志物，但LNC表达Lumican和ALDH1A1单细胞平均荧光强度低于角膜基质细胞，Lumican差异最明显。Dil红色荧光显示LNC和角膜基质细胞在兔角膜基质层可存活4周以上，前两周荧光位置无明显改变，第4周角膜基质细胞荧光形态有略向外扩散的趋势。HE切片未见明显角膜基质层瘢痕。移植4周的家兔眼球切片免疫荧光染色显示有少量LNC和较多角膜基质细胞在兔基质层存活并表达Lumican，角膜基质细胞在基质呈层状排列分布，未向上皮、前房迁移。
　　结论：本研究发现原代LNC和角膜基质细胞在体外培养形态有所不同，第3代后变得相似；LNC表达4种角膜基质细胞标志物，其中Lumican和ALDH1A1荧光强度弱于角膜基质细胞；Keratocan和Laminin强度无明显差别。LNC和角膜基质细胞具有较高的同源性和相似性，是用于分化培养角膜基质细胞的最佳干细胞来源之一。通过细胞注射的方式增加角膜基质细胞数量具有可行性。