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【目的】1.对比金胺O染色和抗酸染色检测组织切片中结核杆菌的敏感性和特异性,探讨金胺O染色法检测组织切片中结核杆菌的可行性和优越性。2.对比金胺O染色和抗酸染色检测组织切片中麻风杆菌的结果,探讨金胺O染色法检测组织切片中麻风杆菌的可行性和优越性。3.通过组织修复等方法改良金胺O染色法并验证改良后的金胺O染色法在检测组织切片中的结核杆菌时,阳性率显著提高。【方法】1.收集本科室既往存档诊断为结核病的石蜡组织,切片后同时行抗酸染色和金胺O染色,分别通过光学显微镜和荧光显微镜观察比较两种方法结果中的阳性定位、杆菌形状,比较镜检时间,以异物性肉芽肿石蜡组织切片为对照组,统计学分析两种染色方法结果。2.收集本科室既往存档麻风病例石蜡组织,切片后同时抗酸染色和金胺O染色,分别通过光学显微镜和荧光显微镜下观察比较两种方法结果的阳性定位,比较分析两种染色方法结果。3.利用柠檬酸高温高压法、EDTA煮沸法等组织修复方法预处理石蜡切片来改良金胺O染色法,从中寻找一种改良效果好、操作简单的最佳改良方法;收集经荧光实时定量PCR检测结核杆菌阳性的石蜡组织,切片后同时行改良金胺O染色法、经典金胺O染色法和抗酸染色法,统计学分析比较三种染色结果。【结果】1.用荧光显微镜观察金胺O染色阳性结果,结核、麻风分支杆菌呈亮绿色的细杆状或短棒状,在暗色背景下对比清晰,在杆菌数量较少时也不易漏诊,镜检时间短;光学显微镜下,抗酸染色阳性结果中杆菌呈红色,在蓝色背景下对比不够清晰,数量较少时容易漏诊,镜检时间长。在122例存档结核病组织切片结核杆菌的检测中,抗酸染色阳性41例(阳性率33.6%)金胺O荧光染色阳性58例(阳性率47.5%);对照组均为阴性。两种方法结果有统计学差异(P<0.05)。2.在6例麻风病蜡块组织切片中麻风杆菌的检测中,金胺O荧光染色和抗酸染色均全部显示麻风杆菌阳性。其中一例瘤型麻风金胺O染色在皮肤的真皮肉芽肿组织中发现大量麻风杆菌外,在表皮内也可以找到少量单根散在的麻风杆菌;连续切片的抗酸染色切片中皮肤真皮肉芽肿组织中发现大量麻风杆菌,但未能看到表皮层内单根散在的麻风杆菌。3.经过对比几种修复方法,EDTA修复操作简单,修复后染色效果好,选为改良金胺O染色的首选方法;100例经荧光实时定量PCR检测结核杆菌阳性的结核病组织切片检测中,抗酸染色阳性率为58%,传统金胺O染色为65%,改良金胺O染色为89%,三组间阳性率差异有统计学意义(P<0.001)【结论】1.检测组织切片中结核杆菌,金胺O染色阳性率显著高于抗酸染色,特异性高,操作简单,可以作为代替抗酸染色的常用方法。2.检测组织切片中麻风杆菌,当感染的杆菌数量较少时,金胺O染色优于抗酸染色,操作简单,可以作为代替抗酸染色的常用方法。3.经过EDTA修复改良后的金胺O染色法,在检测组织切片中结核杆菌时,其阳性率显著高于抗酸染色和经典金胺O染色法,特异性高,操作简单,是值得推广的可行的检测组织切片结核杆菌的好方法。