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漆酶是一种含铜的多酚氧化酶,可催化氧化许多结构复杂的物质,例如酚类和芳香胺类等,有重要的应用价值。随着漆酶研究的深入,漆酶在环境中的应用也日益广泛,而漆酶的生产纯化是应用的关键,故其成为了研究的热点问题。本论文以Roseovariussp.IOB-7为漆酶生产菌,研究了 IOB-7产漆酶的生产特性,并通过盐析、透析、超滤、电泳、离子交换层析等多种方法对IOB-7产漆酶进行了分离纯化。研究了 pH值、温度等因素对漆酶酶活的影响,同时初步研究了 IOB-7产漆酶对染料和酚类等有机污染物的降解作用。实验发现菌株IOB-7能够氧化碘离子形成碘单质,在含有K]I和可溶性淀粉的2216E固体培养基上能够形成紫色菌落。细菌IOB-7分泌的漆酶为胞外漆酶,其发酵液酶活力在48 h后达到最大值。添加CuS04溶液能够促进菌体的增长,从而增加漆酶的分泌,添加CuS04溶液后菌液酶活力比未添加时提高了 1.75倍。菌株IOB-7液态发酵所产的漆酶通过硫酸铵分级沉淀、透析、离子交换层析等分离纯化后得到的漆酶,纯化倍数为12;采用30 KD超滤管直接浓缩发酵液,其比活力为602.34U/mg,提高了 77倍。样品经凝胶电泳染色结果显示目的蛋白的分子约为66 KD。纯化后IOB-7漆酶的最适pH值为5.5,在pH 4.5-7的范围内孵化5 h后,酶活力仍有80%以上,具有较好的耐碱性和较宽的pH范围。最适反应温度为50℃,且在30-60 ℃温度范围内热稳定性较好,孵化30 min后酶活维持在70%以上。以KI作为底物,在pH5.5、反应温度20℃的条件下,IOB-7漆酶最大反应速度Vmax=1.945μmol.L-1.min-1,米氏常数为 Km=2.983mmol/L。IOB-7漆酶对苯酚、4-氯酚、2,4-氯酚等的降解效果一般,添加ABTS能促进酚类物质的降解。IOB-7漆酶对刚果红的脱色能力较差,但是对孔雀石绿显示了其脱色潜力,pH7时,加入10U/L的IOB-7漆酶,孔雀石绿的脱色率增加到73.3%, pH9时,脱色率增加到88.3%。