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慢性阻塞性肺疾病(chronic obstructive pulmonary disease,COPD)是引起全球呼吸系统疾病发病率和死亡率不断上升的重要原因之一。气流受限不完全可逆、呈进行性发展,和肺功能的下降是其特征性表现。COPD的发病机制尚未完全明了。目前普遍认为COPD是气道、肺实质和肺血管的慢性炎症,在肺的不同部位有肺泡巨噬细胞、T淋巴细胞(尤其是CD+8)和中性粒细胞的增加。除炎症外,肺部的蛋白酶和抗蛋白酶失衡及氧化与抗氧化失衡也在COPD发病中起重要作用。COPD的发生发展与体内诸多趋化活素、细胞因子、生长因子和酶等密切相关。本实验采用免疫细胞化学、免疫组织化学、半定量逆转录-聚合酶联反应和Western blotting技术研究环氧合酶-2(cyclooxygenase-2,COX-2)、血小板源性生长因子A(platelet-derived growth factor,PDGF-A)和血小板源性生长因子B(platelet-derived growth factor,PDGF-B)在COPD大鼠模型肺组织中及肺泡Ⅱ型上皮细胞中的表达,并通过观察白细胞介素-4(interleukin 4,IL-4)对其表达的影响,以探讨COPD的发病机制及其防治方法。本实验分为三部分:第一部分: COPD大鼠肺组织中COX-2和PDGF的表达目的探讨COPD大鼠肺组织中环氧合酶-2(COX-2)、血小板源性生长因子A(PDGF-A)和血小板源性生长因子B(PDGF-B)的表达及地塞米松对其表达的影响。方法用雄性Wistar大鼠建立吸烟大鼠COPD模型。24只大鼠随机分为对照组、模型组和地塞米松组,每组均8只。用免疫组化法、半定量逆转录-聚合酶联反应法和Western blotting法,检测各组肺组织中COX-2、PDGF-A和PDGF-B的表达情况。结果与对照组相比,模型组、地塞米松组肺组织中COX-2、PDGF-A和PDGF -B的表达明显增高;与模型组相比,地塞米松组的表达显著降低。结论COPD肺组织中COX-2、PDGF-A和PDGF-B的表达显著增高,地塞米松可明显降低其表达,即可干预COPD模型的建立。第二部分:IL-4抑制吸烟大鼠COPD的形成目的探讨白细胞介素-4(IL-4)对COPD大鼠模型建立的影响,以及COPD肺组织中环氧合酶-2(COX-2)、血小板源性生长因子A(PDGF-A)和血小板源性生长因子B(PDGF-B)的表达及IL-4对其表达的影响机制。方法用雄性Wistar大鼠建立吸烟大鼠COPD模型。40只大鼠随机分为对照组、模型组、地塞米松组、IL-4a组和IL-4b组,每组均8只。用免疫组化法、半定量逆转录-聚合酶联反应法和Western blotting法,检测各组肺组织中COX-2、PDGF-A和PDGF-B的表达情况。结果与对照组相比,模型组、IL-4组和地塞米松组肺组织中COX-2、PDGF-A和PDGF-B的表达明显增高;与模型组相比,IL-4组和地塞米松组的表达显著降低;IL-4组和地塞米松组二者差异无统计学意义。结论IL-4和地塞米松可干预COPD模型的建立;COPD肺组织中COX-2、PDGF-A和PDGF-B的表达显著增高,IL-4和地塞米松可明显降低其表达。第三部分:COPD肺泡Ⅱ型上皮细胞中COX-2和PDGF的表达目的探讨COPD大鼠肺泡Ⅱ型上皮细胞(ATⅡ)中环氧合酶-2(COX-2),血小板源性生长因子A(PDGF-A)和血小板源性生长因子B(PDGF-B)的表达,及白细胞介素-4(IL-4)和地塞米松对其表达的影响。方法用雄性Wistar大鼠建立吸烟大鼠COPD模型。22只大鼠随机分为对照组和模型组(16只),取其整肺做原代培养出肺泡Ⅱ型上皮细胞,并用IL-4和地塞米松干预模型组的肺泡Ⅱ型上皮细胞。用免疫细胞化学法检测肺泡Ⅱ型上皮细胞爬片中COX-2、PDGF-A和PDGF-B的表达。结果模型组COX-2、PDGF-A和PDGF-B表达明显增高; IL-4干预组和地塞米松组表达显著降低。结论COPD大鼠肺泡Ⅱ型上皮细胞中COX-2、PDGF-A和PDGF-B的表达显著增高,IL-4和地塞米松可降低其表达。