采用薄层色谱-生物自显影技术研究和评价厚朴等三种中药的抗氧化活性

来源 :上海中医药大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:xub23
下载到本地 , 更方便阅读
声明 : 本文档内容版权归属内容提供方 , 如果您对本文有版权争议 , 可与客服联系进行内容授权或下架
论文部分内容阅读
现代药理学研究表明自由基与多种疾病的发生和发展密切相关,而目前广泛使用的合成抗氧化剂如BHT和BHA具有潜在的毒性和致癌作用,因此从传统中药和天然药物中寻找低毒、有效、价廉的抗氧化剂是目前抗氧化剂发展的一个必然趋势。另一方面,中药成分复杂,如何从中快速寻找活性成分并依此评价其质量是现代中药研究的重点和难点,并一直为国际医学界所关注。本论文就上述两方面问题,应用薄层色谱一生物自显影技术实现对中药抗氧化活性成分筛选、鉴定和品质评价的研究。 首先,以已知活性化合物为研究对象,将薄层扫描与薄层色谱.生物自显影技术联用,对各项试验参数如测定波长、显色方法、显色时间、反应时间、薄层板种类等进行了详细的考察,建立了清除DPPH自由基的活性筛选模型。并从方法的适应性、重复性、精密度和准确度等方面对筛选模型进行了验证和测试,结果表明该模型重复性良好,精密度和准确度较高,适用于不同时间、不同操作者乃至不同实验室对具有DPPH自由基清除能力的化合物的筛选和评价。同时将测定结果与传统的紫外分光光度法(与96孔板结合)进行了对比,结果表明两方法测定结果具有很高的相关性(r>0.90)。 其次,采用薄层色谱.生物自显影方法对中药进行定性鉴别研究。我们选取厚朴、乌药和紫苏子三种中药,采用0.04%的DPPH<·>乙醇溶液和传统显色剂显色,拍摄图像,采用模拟扫描,获得各抗氧化成分的峰面积,以总峰面积大小为指标判定不同来源中药的抗氧化能力,结果表明浙江天台产乌药(94340)、四川凉山产厚朴(175647)和收集于上海的紫苏子(153206)清除DPPH自由基能力最强。以化学对照品峰面积与总峰面积的百分比来判定化合物抗氧化活性,表明去甲异波尔定(43.8%~66.0%)、厚朴酚与和厚朴酚(73.2%~93.2%)、木犀草素与芹菜素及成分“U”(47.6%~68.0%)分别是乌药、厚朴和紫苏子的主要抗氧化活性成分。该方法在中药抗氧化活性成分筛选及质量评价方面具有操作简便、选择性高、重现性好等优点。在对紫苏子的定性鉴别的同时,发现具有很强活性的未知成分“U”,采用薄层色谱.生物自显影法进行导向分离,得到化合物“U”(4.5 mg),经核磁共振光谱和质谱鉴定为迷迭香酸。 最后,采用薄层色谱一生物自显影对中药进行了定量研究,在此基础上,探讨中药中化学成分含量高低与活性大小的相关性。我们选用厚朴为研究对象,采用新方法对厚朴中厚朴酚与和厚朴酚进行了定量分析,结果表明,该方法线性关系良好(厚朴酚:r<2>=0.9998;和厚朴酚:r<2>=0.9997),重复性良好(厚朴酚与和厚朴酚的RSD分别为0.60%和0.73%,n=6),高中低3个浓度的平均回收率为97.93%(厚朴酚)和101.57%(和厚朴酚)(其RSD分别为2.42%和2.19%,n=9)。九个不同来源厚朴的测定结果与高效液相法测定结果在统计学上没有显著性差异(P<0.05),表明薄层色谱.生物自显影技术能够对厚朴中活性成分厚朴酚与和厚朴酚准确定量。同时,薄层色谱.生物自显影法对厚朴药材中厚朴酚、和厚朴酚的抗氧化能力进行了比较,结果表明厚朴酚与和厚朴酚为厚朴中主要抗氧化活性成分,其中和厚朴酚对厚朴的抗氧化贡献较大,提示和厚朴酚的含量应作为厚朴质量评价的主要指标。 综上所述,本论文以抗氧化活性成分为研究对象,采用薄层色谱.生物自显影技术建立了中药抗氧化活性筛选模型,在此基础上,对厚朴等三种中药进行了定性鉴别,对厚朴中主要抗氧化活性成分进行了含量测定,建立了一种中药抗氧化活性成分筛选、鉴定和品质评价一体化的分析方法,为中药活性成分的研究与中药质量控制提供新思路。
其他文献
为了有效地实施激光干扰,需要确定高能激光对四象限制导器件的影响。分析了由高能激光诱导的四象限制导器件的温升分布。理论分析和数值计算表明,在持续的强激光作用下,会造
目的:   利用血管舒张药物筛选平台,以一氧化氮信息系统为基本靶系统对38味中药进行第一次筛选,并对活性部位的舒张作用机制进行探讨。在此基础上,以内皮型一氧化氮合酶(e
学位
黑色素的积累,不仅影响肤色,过量积累还会引起雀斑、褐斑等相关疾病,甚至诱发黑色素瘤。近年来黑色素瘤的发病率呈逐年上升趋势,它具有转移早、进展快、预后差、死亡率高的特点。
森林管护是保护和开发我国珍惜林业资源的基础性工作,在天然林中做好森林管护工作对天然保护工程具有重要意义。为了不断扩大我国的森林面积,本文从森林管护工作意义出发,阐述了
鹿茸系鹿科动物梅花鹿(CervusnipponTemminck)或马鹿(Cervuselaphuslinnaeus)的雄鹿未骨化密生绒毛的幼角。其在临床方面的应用已有上千年的历史,中医主要用其治疗虚劳赢瘦、
丹参(Salvia miltiorrhiza Bunge)是唇形科鼠尾草属多年生草本植物,其干燥根可以入药,具有活血祛瘀、通经止痛、清心除烦和凉血消痈等功效,是临床治疗心脑血管系统疾病的常用药
目的:复方木尼孜其颗粒(以下简称MNZQ)在临床上被广泛用于治疗炎症及疼痛方面的疾病,但其应用缺乏相关基础的药理药效研究性资料。本文旨在评价MNZQ的抗炎镇痛药效,为其临床应用
本文对不同产地、不同来源的中药黄芩进行系统研究,建立黄芩药材的色谱指纹谱,确定了黄芩提取物的所用药材,同时对黄芩提取物的工艺进行了系统完整的考察,建立了稳定可行的提取工
巴东过路黄(Lysimachia patungensis Hand.-Mazz.)是报春花科(Primulaceae)珍珠菜属(Lysimachia L.)植物,广泛分布于湖北、湖南、广东、江西、安徽、浙江等地,为我国特有的植物
2013年9月23日至24日,随园开园盛典暨中国私家盆景园俱乐部第二届联谊会在常州成功举办,海内外盆景组织代表、业界专家学者、私家盆景园主、盆景企业代表和广大的盆景爱好者