【摘 要】
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肌纤维的类型与组成是影响猪肉品质的重要因素。研究表明,肌肉的食用特性(嫩度、风味、多汁性)与肌纤维的直径、数目以及肌纤维类型有着密切的联系。为了深入研究肌纤维与肉质之间的关系,本文对377头“壮乡黑猪”(广西晨康力食品股份有限公司的商业品牌)的背最长肌肌纤维进行了的组织学特性分析,测定获得了肌纤维的周长、面积、长径和短径等数据,并分析了肌纤维特性与肉质性状之间的关系。基于实验室前期e QTL(ex
【基金项目】
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国家自然科学基金(31872326,31471180,31790413);
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肌纤维的类型与组成是影响猪肉品质的重要因素。研究表明,肌肉的食用特性(嫩度、风味、多汁性)与肌纤维的直径、数目以及肌纤维类型有着密切的联系。为了深入研究肌纤维与肉质之间的关系,本文对377头“壮乡黑猪”(广西晨康力食品股份有限公司的商业品牌)的背最长肌肌纤维进行了的组织学特性分析,测定获得了肌纤维的周长、面积、长径和短径等数据,并分析了肌纤维特性与肉质性状之间的关系。基于实验室前期e QTL(expression Quantitative Trait Locus)分析的结果,初步鉴定了两个调控肌纤维类型标志基因MYLPF和TNNC2表达的cis-eQTL功能突变,并通过关联分析评估了其多态性与肉质性状的关系。取得的主要结果如下:(1)在“壮乡黑猪”的三个杂交组合中,DLC的单根肌纤维面积平均值为2415.951±567.203μm~2,DDLC的单根肌纤维面积平均值为2013.337±471.771μm~2,DLLC的单根肌纤维面积的平均值为2433.137±566.575μm~2。(2)对肌纤维性状与肉质性状进行相关分析的结果显示肌纤维面积与屠宰后的24小时pH值呈极显著的负相关(r=-0.274,p<0.01),即肌纤维的面积越大,则其24小时后的p H值越低。(3)对MYLPF表达水平极端个体测序数据进行对比分析,在该基因第一外显子上鉴定到高低组间具有相对差异的G>A突变(rs330629900),该突变导致转录本的剪接发生了改变。双荧光素酶报告基因载体实验表明A等位基因启动子活性是G等位基因启动子活性的7.463倍(p=0.006)。在壮乡黑猪群体中进行关联分析,结果显示该突变位点的多态性与肌纤维周长(p=0.013)、肌纤维面积(p=0.043)显著关联;进一步在瘦肉型猪商业杂交群体中进行关联分析,结果显示该位点多态性与眼肌面积(p=0.036)极显著关联。(4)对TNNC2-201表达水平极端个体测序数据进行对比分析,在该基因第一外显子上鉴定到两个偶联的INDEL(17bp的插入和11bp的剪接供体缺失),携带INDEL的等位基因产生了一个5"UTR缺少42bp的新转录本。q RT-PCR结果显示,TNNC2-201转录本在BB基因型(INDEL等位基因纯合个体)中的相对表达水平显著高于AA(p=0.001)和AB基因型(p=0.019)个体。B等位基因在陆川猪中的等位基因频率为96.67%,通城猪中为86.67%,在杜洛克中为0.91%,在长白猪中为2.04%,在约克夏和皮特兰猪中没有检测到多态。关联分析结果显示该INDEL突变的多态性在“壮乡黑猪”群体中与屠宰后24h的p H值(p=0.0004)极显著关联,与滴水损失(p=0.041)、IMF含量(p=0.015)、肌纤维面积(p=0.028)显著关联,在瘦肉型猪商业杂交群体中与屠宰后45min的p H值(p=0.0003)IMF含量(p=0.0005)、屠宰后24小时-48小时的滴水损失(p=0.005)以及水分含量(p=0.002)极显著关联。本研究在“壮乡黑猪”群体中获得的肌纤维性状表型值为后续相关研究积累了宝贵素材;研究鉴定到MYLPF和TNNC2相关功能突变多态性与肉质性状存在关联,为肉质性状的改良提供了新的分子标记。
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