【摘 要】
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目的研究SRY-盒包含蛋白9（Sox9）对脂肪干细胞（ADSCs）软骨分化的作用,并探讨其可能机制。方法实验将脂肪干细胞（ADSCs）分为空白组、空载组、过表达组、联合组。空白组不处理。空载组转染p CDNA3.1（+）-NC质粒,过表达组转染pc DNA3.1（+）-Sox9质粒,联合组转染pc DNA3.1（+）-Sox9质粒,并加入Li C1使其终浓度为60mmol/L。转染48h后采用We
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目的研究SRY-盒包含蛋白9（Sox9）对脂肪干细胞（ADSCs）软骨分化的作用,并探讨其可能机制。方法实验将脂肪干细胞（ADSCs）分为空白组、空载组、过表达组、联合组。空白组不处理。空载组转染p CDNA3.1（+）-NC质粒,过表达组转染pc DNA3.1（+）-Sox9质粒,联合组转染pc DNA3.1（+）-Sox9质粒,并加入Li C1使其终浓度为60mmol/L。转染48h后采用Western blot法检测Sox9、β-连环蛋白（β-catenin）、p-β-catenin、糖原合成酶激酶3β（GSK-3β）蛋白表达量;MTT实验检测ADSCs增殖活性;诱导ADSCs定向分化为软骨细胞,2ld后采用甲苯胺蓝染色观察可聚蛋白多糖（Aggrecan）表达情况;Western blot法检测II型胶原蛋白（Collagen II）蛋白表达量。结果通过与空白组、空载组结果相比较,过表达组MTT实验在24、48、72h A值升高（P＜0.05）;与过表达组相比较,联合组MTT实验在24、48、72h A值降低（P＜0.05）。甲苯胺蓝染色显示细胞膜及细胞质均被染为蓝色,过表达组染色强度强于联合组,联合组强于空白组、空载组,空白组、空载组染色强度差别不明显,实验结果表示过表达组表达大量Aggrecan。与空白组、空载组相比较,过表达组CollagenⅡ蛋白表达量升高（P＜0.05）;与过表达组相比较,联合组CollagenⅡ蛋白表达量降低（P＜0.05）。结论Sox9过表达可促进ADSCs增殖及软骨分化,其作用机制可能与抑制Wnt/β-catenin信号通路有关。
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