【摘 要】
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灰树花是一种珍贵的食药两用真菌.灰树花多糖具有显著的抗肿瘤、抗HIV病毒、改善免疫系统功能、降血脂、降血糖等功能,是一种理想的生物反应调节剂.该课题进行了灰树花多糖高
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灰树花是一种珍贵的食药两用真菌.灰树花多糖具有显著的抗肿瘤、抗HIV病毒、改善免疫系统功能、降血脂、降血糖等功能,是一种理想的生物反应调节剂.该课题进行了灰树花多糖高产菌株的筛选,液体培养工艺条件的优化,液体菌种固体栽培的技术研究,胞内外多糖提取工艺的优化,胞内外多糖纯化工艺的研究,胞内多糖纯化组分-糖缀合物GFPI的结构鉴定和化学修饰,灰树花发酵液及糖缀合物GFPI降血脂生物活性的检测和对GFPI体外抗HIV病毒作用的检测等一系列研究.采用分部沉淀法进行胞外多糖提取工艺的优化,确定提取工艺为:发酵液浓缩5倍,30﹪、60﹪乙醇分部沉淀,pH 7,4℃醇析,胞外多糖得率为3.18g/l.采用AKTAexplorer快速分离纯化系统,首次发现关于215nm,280nm波长下在线定位检测多糖及其蛋白复合物的方法,在215nm波长下的吸收情况与灰树花胞内、外多糖的分布具有直接的对应关系.对于经DEAE-纤维素层析分离得到的多糖、蛋白复合物GFPI,经多种纯度鉴定,确定GFPI为单纯组分.对灰树花发酵液及多糖纯化物进行降血脂作用的研究并对其毒理学进行了初步检测与评价.灰树花糖缀合物GFPI的体外抗HIV活性的检测结果表明,37.5μg/ml的剂量下,对于HIVP<,24>抗原达到了95.88﹪的良好抑制作用,此剂量下具有90﹪的细胞存活率,在18.75、9.375μg/ml的剂量下对于HIVP<,24>抗原的抑制率分别达到了50.15﹪和27.18﹪,且无细胞毒作用.GFPI抑制P<,24>抗原的半数有效浓度为15.85μg/ml.
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