【摘 要】
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目的:异位骨化（Heterotopic ossification,HO）是指在软组织中形成异位骨组织。临床上以创伤性异位骨化为多见,其发病机制尚不明确。本研究旨在探究Treg在异位骨化形成中的变化、二甲双胍对Treg的调节作用以及对异位骨化的影响。方法:小鼠接受跟腱切开和背部灼伤处理,诱导异位骨的形成。建模后,用二甲双胍在不同时间段进行处理,取小鼠跟腱周围肌肉组织。采用q PCR和WB检测相关指标
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目的:异位骨化（Heterotopic ossification,HO）是指在软组织中形成异位骨组织。临床上以创伤性异位骨化为多见,其发病机制尚不明确。本研究旨在探究Treg在异位骨化形成中的变化、二甲双胍对Treg的调节作用以及对异位骨化的影响。方法:小鼠接受跟腱切开和背部灼伤处理,诱导异位骨的形成。建模后,用二甲双胍在不同时间段进行处理,取小鼠跟腱周围肌肉组织。采用q PCR和WB检测相关指标;采用micro-CT和HE染色观察各组跟腱周围组织中异位骨的形成;采用流式细胞仪检测脾脏、淋巴结、损伤肌肉组织和血液中Treg的比例变化。结果:1.与未造模对照组相比,小鼠损伤肌肉组织中Treg标记物Tigit、Lag3、Gltr、Clta-4、Foxp3和Helios的m RNA表达在造模后1天明显降低（p＜0.01）,3天后无明显变化,造模后7天明显增多（p＜0.05）;SMAD6和SMURF1的表达与Treg变化呈类似变化趋势（1天:p＜0.01;7天:p＜0.01）;而AMPK磷酸化（p-AMPK）水平明显下降（p＜0.05）。2.Treg细胞在损伤后的早期明显下降。用二甲双胍在损伤后不同时间点处理小鼠,损伤肌肉组织Treg标记物的m RNA水平明显上升（p＜0.05）,pAMPK显著性升高（p＜0.05）,小鼠的异位骨质体形成明显较少。3.在异位骨形成的早期,二甲双胍促进小鼠损伤肌肉组织中Treg标志物m RNA表达升高（p＜0.05）,伴随SMAD6、SMURF1和p-AMPK表达明显上升（p＜0.05）;小鼠血液Treg的占比明显降低（p＜0.01）,而损伤肌肉组织中Treg的占比却明显增多（p＜0.05）。结论:1.Treg在异位骨化的早期发挥抑制作用。2.二甲双胍可能通过激活创伤部位AMPK、升高Treg比例和抑制BMP信号通路,抑制异位骨化的早期进展。
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