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目的:探讨达拉菲尼在肾脏缺血再灌注损伤（ischemia reperfusion injury,IRI）中的保护作用以及相关机制,旨在为临床治疗缺血再灌注肾脏损伤提供理论基础。方法:体内部分:24只6-8周龄雄性C57BL/6小鼠随机分成4组:假手术组（sham组）、缺血再灌注组（IRI组）、达拉菲尼组（DAB组）、达拉菲尼预处理+缺血再灌注组（DAB+IRI组）,每组6只。采用夹闭双侧肾蒂30min法构建小鼠缺血再灌注损伤模型,于再灌注后24h收集小鼠的血液以及肾脏组织标本。sham组与DAB组仅游离并暴露双侧肾蒂30min;DAB组与DAB+IRI组于术前2h灌胃给予达拉菲尼干预,sham组与IRI组在相同时间灌胃给予等量的助溶剂。检测血肌酐（Scr）和尿素氮（BUN）评估肾功能;HE染色以及PAS染色观察肾脏病理学改变;q RT-PCR以及Western Blot检测肾小管损伤标志物NGAL以及KIM-1 m RNA及蛋白水平;q RT-PCR以及免疫组织化学检测IL-6以及TNF-α等炎症因子的表达;TUNEL+cleaved caspase3共染法检测肾脏组织细胞死亡;Western Blot检测RIP1、RIP3、p RIP3、MLKL、p MLKL等程序性坏死通路相关蛋白以及凋亡关键性蛋白cleaved caspase3的表达水平。体外部分:选取不同浓度的达拉菲尼培养人肾小管上皮细胞（HK-2）24h,CCK-8检测细胞活力,确定达拉菲尼的药物毒性;培养HK-2细胞分成4组:对照组（control组）、缺氧/复氧组（H/R组）、达拉菲尼组（DAB组）、达拉菲尼预处理+缺氧/复氧组（DAB+H/R组）;采用物理缺氧法（缺氧24h,复氧12h）构建缺氧/复氧损伤模型以此来模拟缺血再灌注损伤,分别在细胞缺氧刺激前2h加入达拉菲尼预处理;CCK-8检测各组细胞活力;q RT-PCR、Western blot、免疫荧光检测肾脏损伤标志物NGAL及KIM-1的表达水平;q RT-PCR检测炎症因子IL-6以及TNF-αm RNA水平;Annexin-V/PI双染法检测各组细胞死亡情况;Western blot检测程序性坏死通路相关蛋白RIP1、RIP3、p RIP3、MLKL、p MLKL以及凋亡的关键蛋白cleaved caspase3水平。结果:体内实验:与sham组相比,IRI组Scr、BUN水平升高（p<0.05）,肾组织病理损伤严重,小管损伤标志物NGAL和KIM-1 m RNA和蛋白水平升高,炎症因子IL-6以及TNF-αm RNA含量升高,肾脏组织TNF-α蛋白表达增多,TUNEL和cleaved caspase3共染实验表明肾脏组织细胞死亡增多,RIP1、RIP3、p RIP3、MLKL、p MLKL及cleaved caspase3蛋白表达增加（p<0.05）;与IRI组比较,DAB+IRI组肾功能改善、肾组织损伤减轻,NGAL及KIM-1 m RNA和蛋白水平下降,炎症因子IL-6和TNF-αm RNA水平下调,肾脏组织中TNF-α蛋白表达减少,TUNEL（+）cleaved caspase3（-）细胞减少,RIP3、p RIP3以及p MLKL的蛋白表达减少（p均<0.05）,而RIP1、MLKL及cleaved caspase3蛋白改变不明显。DAB组与sham组间各指标无统计学差异。体外实验:与control组相比,H/R组细胞活力下降（p<0.05）,NGAL及KIM-1 m RNA及蛋白水平升高,HK-2细胞内KIM-1表达增多（p<0.05）,炎症因子IL-6以及TNF-αm RNA表达上调,细胞死亡增多,RIP1、RIP3、p RIP3、MLKL及p MLKL等程序性坏死通路相关蛋白水平上调（p<0.05）,凋亡关键性蛋白cleaved caspase3蛋白水平也有所升高;预处理达拉菲尼能逆转上述改变:与H/R组比较,DAB+H/R组细胞活力提高,NGAL及KIM-1 m RNA及蛋白水平降低,HK-2细胞内KIM-1表达减少（p<0.05）,炎症因子IL-6以及TNF-αm RNA水平下调,细胞坏死比例减少,RIP3、p RIP3及p MLKL程序性坏死通路相关蛋白表达减少（p<0.05）,RIP1、MLKL及cleaved caspase3蛋白水平无明显改变;结论:达拉菲尼可能通过抑制RIP3介导的程序性坏死,从而在肾脏缺血再灌注损伤中发挥保护作用。