论文部分内容阅读
小菜蛾（Plutella xylostella L.）为重要的十字花科蔬菜害虫,因其生命周期短、繁殖能力强以及生产中过量频繁用药,现在其已对绝大多数杀虫剂产生抗性。氯虫苯甲酰胺因其新颖的作用靶标,良好的速效持效性以及对哺乳动物的低毒性等优势而得到广泛应用,但小菜蛾对氯虫苯甲酰胺的抗性问题也越来越突出。前期研究发现,抗性小菜蛾的酚氧化酶活性、酶基因转录和翻译水平等均有升高,为进一步探讨酚氧化酶介导的免疫防御可能参与小菜蛾对氯虫苯甲酰胺抗性发展的机理,探讨酚氧化酶高效抑制剂作为增效剂协同氯虫苯甲酰胺防治小菜蛾的可能性,本文采用室内生物测定、荧光定量PCR、蛋白印迹法和酶活力测定等多种方法开展实验研究,得到的结果如下:1.在前期抗性汰选的基础上,继续使用点滴法测定小菜蛾对氯虫苯甲酰胺的抗性水平,得到对氯虫苯甲酰胺抗性倍数达高水平抗性的小菜蛾,其抗性倍数达473倍,LD50值为411.39μg/g。2.用3,4-二羟基苯甲醛缩氨基硫脲（下述简称化合物A）、4-甲氧基苯甲醛缩氨基硫脲（化合物B）、水杨醛缩氨基硫脲（化合物C）等缩氨基硫脲类化合物处理抗性试虫24 h后,再用氯虫苯甲酰胺对其进行毒力测定。结果表明化合物A、B处理后的小菜蛾对氯虫苯甲酰胺的抗性有所提高,不同的世代间抗倍数性平均提升37.87和26.09倍;化合物C处理后小菜蛾抗性倍数降低,不同的世代间抗性平均下降13.42倍。3.将用化合物A、B、C及氯虫苯甲酰胺分别先后处理抗氯虫苯甲酰胺品系试虫后,仍存活的试虫进行PPO基因的转录水平、PPO2蛋白表达量以及PO酶活力进行测定。结果表明,仅用氯虫苯甲酰胺处理的试虫酚氧化酶变化不明显;经化合物A、B处理后小菜蛾的酚氧化酶转录表达水平、蛋白表达量以及酶活力与对照相比有明显提高,经化合物C处理后小菜蛾的酚氧化酶转录表达水平、蛋白表达量以及酶活力与对照相比有明显的降低。4.水杨醛缩氨基硫脲可以作为增效剂与氯虫苯甲酰胺配伍防治抗性小菜蛾。