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本课题研究了腹腔注射菌体脂多糖（LPS），激活核因子（NF-кB）信号通路对食欲调节机制的影响。通过对LPS诱导厌食机制的研究，筛选出调节采食的关键基因及蛋白，从而确定了采用中枢灌注药物的方法，干预LPS诱导的动物厌食，为改善LPS诱导的动物厌食提供理论依据。试验一：体重相近的8周龄健康小鼠24只，随机均分成4组，饲养在环境控制的鼠房内，室内温度控制在23±0.1自由采食和饮水。试验期，小鼠禁食24小时后，分别按照0，10，100，1000μg/kg体重的剂量腹腔注射LPS。分别记录注射后1、2、4、6、12、24小时的采食量及体重。结果发现：与对照组相比，LPS处理的所有时间点的采食量均显著降低（p<0.01），处理组内小鼠24h的体重也显著降低，但24小时以后，10μg及100μg处理组的小鼠的体重均出现了恢复；在LPS处理组中，随着LPS浓度的增加，动物的采食量和体重显著降低。以上结果表明：LPS能够降低动物的采食和体重，并且呈现剂量依赖性。试验二：8周龄体重相近的健康小鼠36只，随机均分成4组，饲养在环境控制的鼠房内，温度控制在23±0.1由采食和饮水。试验前，所有小鼠禁食24h后，于18:00点分别按照0，100，500μg/kg体重的剂量腹腔注射LPS。注射LPS2小时后，将小鼠颈部移位处死，并迅速剥离下丘脑，进行样品分析。试验结果表明：LPS处理显著的提高了下丘脑内抑制食欲的基因POMC的mRNA水平（p<0.05）。利用Western Bloting技术测定下丘脑内FoxO1的磷酸化水平，发现FoxO1在Ser256和Thr24/FoxO3a (Thr32)位点的磷酸化水平显著上调（p<0.05），并且显著增强了细胞浆内FoxO1的水平（p<0.05）；在测定细胞因子的基因表达量时，发现LPS处理显著提高了IL-1α、IL-1β、IL-6、TNF-α的mRNA水平（p<0.05）；NF-кB蛋白磷酸化测定过程中，发现LPS处理显著地提高了NF-кB在Ser536位点的磷酸化水平（p<0.05），同时细胞核内NF-кB在该位点的磷酸化水平也显著提高；除此之外，AMPK在Thr172位点的磷酸化水平显著下调，而mTOR在Ser2448位点及P70S6K在Thr389位点的磷酸化水平均显著上调。上述结果提示：LPS处理可能是通过增加细胞因子的释放，从而激活NF-кB信号通路，引起食欲基因的变化，而影响动物的采食量；另外，AMPK以及mTOR信号可能也参与了LPS引起的动物厌食。试验三：试验选用体重相近的8周龄雄性昆明小鼠24只，随机均分为A、B、C、D4个组。禁食24小时后，于18:00点A、C组小鼠脑室注射人工脑脊液（artificialcerebrospinal fluid，ACSF），B、D组小鼠脑室注射AICAR。脑室注射1小时后，A、B组小鼠再腹腔注射LPS（500μg/kg BW），C、D两组注射生理盐水，记录采食量。样品采集：在小鼠腹腔注射2h后，将小鼠颈部移位处死，随后迅速剥离下丘脑，进行样品分析。结果显示：脑室注射AICAR没有影响LPS组小鼠的采食量（p>0.05），提示AMPK信号通路可能不是LPS诱导动物厌食中的关键通路。试验四：体重相近的8周龄雄性昆明小鼠24只，单笼饲养，饲喂基础日粮，自由饮水。试验期将小鼠随机平均分成A、B、C、D四个组。所有小鼠提前禁食24h后，于18:00点，A、C组脑室注射人工脑脊液1μl，C、D组按照20μg/μl的剂量脑室注射mTOR阻断剂Rapamycin1μl。脑室注射1小时后，B、D组按照500μg/kg体重的剂量腹腔注射LPS，另外两组注射同剂量的生理盐水。记录1，2，4，6，12，24小时的采食量。样品采集：在小鼠腹腔注射2h后，将小鼠颈部移位处死，随后迅速剥离下丘脑，进行样品分析。由结果可知：脑室注射Rapamycin显著提高了LPS诱导的厌食小鼠的采食量（p<0.05），显著的下调了抑食基因POMC的mRNA水平（p<0.05），显著的提高了NPY/AgRP的mRNA水平（p<0.05）；测定细胞因子的mRNA水平发现，脑室注射Rapamycin，显著降低了细胞因子IL-1α、TNF-α的mRNA水平(p<0.05)，IL-1β的mRNA水平呈现下调的趋势，而IL-6的mRNA水平没有显著的变化；另外，Rapamycin处理显著降低了LPS诱导的FoxO1、NF-кB、mTOR、P70S6K的高磷酸化水平（p<0.05）。以上所述结果提示：Rapamycin可能是通过降低细胞因子的释放水平，使得调节食欲基因表达的蛋白的功能的恢复，从而食欲基因的表达得到改善，继而使LPS诱导的小鼠的采食量增加。