白介素10对大鼠脑缺血神经细胞凋亡的抑制作用及其机制探讨

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目的:探讨白介素10(Interleukin-10,IL-10)对大鼠脑缺血神经细胞凋亡的抑制作用及其分子生物学机制,并通过观察康复训练对脑缺血大鼠神经功能恢复和脑组织中IL-10含量变化的影响,探讨IL-10与康复训练促进脑缺血神经功能恢复的关系。 方法:参照Zea Longa线栓法制备大鼠大脑中动脉阻塞(Middle Cerebral Artery Occlusion,MCAO)局灶性脑缺血模型,并在脑立体定位仪下经侧脑室注射IL-10,TUNEL法观察缺血梗死灶周围脑组织神经细胞凋亡的变化,免疫组织化学法和半定量RT-PCR法检测凋亡调节基因Bcl-2、Bax、Fas、FasL和Caspase-3的表达,探讨IL-10对大鼠缺血梗死灶周围脑组织神经细胞凋亡的作用及其分子生物学机制。对脑缺血大鼠进行平衡、抓握、旋转、行走等康复训练,于MCAO后3d,7d,14d进行神经功能评估,并采用双抗体夹心ELISA法测定脑组织中IL-10浓度,探讨康复训练对脑缺血大鼠神经功能恢复和脑组织中IL-10含量变化的影响。 结果:脑缺血后凋亡神经细胞(TUNEL阳性细胞)主要见于梗死灶周围的纹状体及额顶皮质下脑组织,与Bcl-2、Bax、Fas、FasL和Caspase-3阳性细胞分布相一致。与假手术组相比,脑缺血组凋亡神经细胞数目显著增多,梗死灶周围脑组织Bcl-2、Bax、Fas、FasL和Caspase-3蛋白和mRNA表达显著上调(p<0.01),Bcl-2/Bax比值显著下降(p<0.01);与溶剂对照组相比,经侧脑室注射IL-10干预组凋亡神经细胞数目显著减少(p<0.05),促凋亡基因Bax、FasL、Caspase-3蛋白和mRNA表达显著下调(p<0.05 or p<0.01),抗凋亡基因Bcl-2蛋白和mRNA
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