【摘 要】
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背景肺动脉高压是一类由多种因素导致的罕见临床综合征,通常伴有不良预后,其特点是中小肺动脉重塑。肺动脉高压与交感神经系统的激活有关,但具体机制尚未完全阐明。目的评估野百合碱诱导的大鼠肺动脉高压模型中肺中小血管周围交感神经递质去甲肾上腺素和神经肽Y的水平及其在肺血管重塑的作用。方法采用随机方法对20只6-8周龄的大鼠进行分组:对照组（Control组,n=9）和野百合碱诱导肺动脉高压组（MCT-PAH
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背景肺动脉高压是一类由多种因素导致的罕见临床综合征,通常伴有不良预后,其特点是中小肺动脉重塑。肺动脉高压与交感神经系统的激活有关,但具体机制尚未完全阐明。目的评估野百合碱诱导的大鼠肺动脉高压模型中肺中小血管周围交感神经递质去甲肾上腺素和神经肽Y的水平及其在肺血管重塑的作用。方法采用随机方法对20只6-8周龄的大鼠进行分组:对照组（Control组,n=9）和野百合碱诱导肺动脉高压组（MCT-PAH组,n=11）。MCT-PAH组造模采用野百合碱经腹腔注射,Control组注射溶剂。6周后经腹腔留置针针头测量右心室压力。右心肥厚指数的评价通过右侧与左室及间隔分离称重计算。石蜡包埋中远端右中肺及心肌组织做病理切面,包括HE染色和免疫荧光,比较两组之间肺动脉平滑肌细胞周围去甲肾上腺素和神经肽Y的变化和评估肺动脉的增殖情况。同时采用WB比较两组肺组织两种神经递质的含量变化,采用ELISA法检测血浆去甲肾上腺素和神经肽Y的变化情况。取SD大鼠肺动脉组织做原代肺动脉平滑肌细胞培养,取3-6代细胞分别使用去甲肾上腺素、神经肽Y干预处理,肺动脉平滑肌细胞的增殖通过CCK8、流式细胞术和WB检测,肺动脉平滑肌细胞的迁移采用细胞划痕实验检测。结果1.与对照组相比,MCT-PAH组RVSP（13.3±2.1 mm Hg vs.33.2±5.9 mm Hg,P＜0.01）、RVDP（3.6±2.7mm Hg vs.16.7±5.0mm Hg,P＜0.01）、m PAP（6.6±1.8mmhg vs.22.2±1.5mm Hg,P＜0.01）以及RVHI（29.4%±5.3%vs.68.0%±13.1%,P＜0.01）均明显升高。2.与对照组相比,MCT-PAH组观察到肺血管观察到远端肺小动脉呈向心性肥厚,管壁增厚,管腔明显变窄,MWT%（38.5%±11.8%vs.64.5%±8.4%,P＜0.01）和VWA（56.4%±9.4%vs.85.6%±5.9%,P＜0.01）,Ki67表达增加（P＜0.01）。3.与对照组相比,MCT-PAH组血浆NE（100.3±9.0nmol/L vs.124.7±20.7nmol/L,P＜0.01）和NPY（914.2±181.5ng/L vs.1116.0±138.9ng/L,P＜0.05）水平升高,肺组织和远端小肺动脉平滑肌细胞周围的TH（P＜0.01）和NPY（P＜0.05）表达增加,α1-AR和NPY1R的表达也上调。4.体外实验结果显示与对照组相比,NE组（P＜0.05）和NPY（P＜0.01）组在浓度为100nmol/L使PASMCs的细胞活力最高,CFSE标记的PASMCs增殖指数和分裂指数均显著增加。NE组PCNA和Cyclin E1表达也升高。5.与对照组相比,NE和NPY组PASMC的划痕伤口加速愈合。结论1.MCT-PAH大鼠循环、肺组织和肺小动脉平滑肌细胞周围NE和NPY的表达量均增加,这可能与全身交感神经系统和局部肺交感神经均过度激活有关。2.NE和NPY能够促进PASMCs增殖和迁移,这表明NE与NPY可能参与了PAH肺血管的重塑过程。
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