甘油氧化酶生产菌株的选育及甘油氧化酶酶学性质的研究

来源 :南开大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:tongxu1
下载到本地 , 更方便阅读
声明 : 本文档内容版权归属内容提供方 , 如果您对本文有版权争议 , 可与客服联系进行内容授权或下架
论文部分内容阅读
甘油氧化酶(GlycerolOxidase,GLOX)在氧气存在的情况下,可将甘油氧化为甘油醛,同时产生过氧化氢。甘油氧化酶可以替代甘油激酶和甘油磷酸氧化酶对血液中甘油三脂进行测定。甘油氧化酶还可将乙二醇经由羟乙醛氧化为乙二醛,可将乙醇酸氧化为乙醛酸。因为酶催化反应的速度快,无副产品产生,如将其用于工业生产乙二醛和乙醛酸,具有广泛的应用前景。 本研究从一株产甘油氧化酶的日本曲霉(AspergillusjaponicusSaito)As8586出发,首先对其发酵条件进行了一系列的研究,然后分别通过紫外线和亚硝基胍诱变,获得一株相对稳定高产的诱变菌株Aj100015,其酶活力达到2.1U/ml;最后设计单因子实验和正交实验对原始培养基进行了优化,结果在含4%甘油,0.4%酵母浸膏,0.13%K2HPO4,0.05%KCl,0.1%MgSO4,0.018%FeSO4,0.1%玉米浆,初始pH为6.2的培养基中,于30℃,200转/分的转速下,培养48小时,产生的甘油氧化酶活力最高,达到4.1U/ml。 通过收集菌体,高压破碎,硫铵盐析,SephadexG-25凝胶过滤,QSepharoseHP离子交换,SephacrylS-300凝胶过滤层析对甘油氧化酶蛋白进行了分离纯化,并通过非变性聚丙烯酰胺凝胶电泳确定其分子量为416KD,经SDS-PAGE确定其由八个分子量约为52.3KD的亚基组成。等电聚焦电泳测得其等电点为4.9。 甘油氧化酶在以甘油为底物时,最适作用温度为37℃,最适pH为5.0,其Km值为8.4mmol/L,Vmax为12.3×10-3mmol/L·min-1。甘油氧化酶在pH9.5的碱性条件下较为稳定,金属离子Cu2+、Ca2+和Zn2+对酶活有一定的激活作用,Hg2+则有明显的抑制作用。
其他文献
目的 探析高危冠心病合并糖尿病病人应用主动脉内球囊反搏治疗及术后护理的临床效果.方法 对2017年1月~2019年1月在我院进行治疗的92例高危冠心病合并糖尿病病人进行研究,采用
髋关节骨性关节炎是一种慢性退行性骨关节病,本文从病名渊源、病因病机、中医疗法三个方面对髋关节骨性关节炎进综述,以便更好的结合临床.
目的 研究分析人性化护理干预在糖尿病护理中的应用效果.方法 2018年10月到2019年9月,本院一共收治112例糖尿病患者,按照双色球分组原则将患者依次分为研究组(n=56例,实施常
目的 分析运动疗法联合瑞格列奈治疗2型糖尿病疗效.方法 选我院糖尿病患儿60例.随机分成瑞格列奈治疗的对照组及采用药物、运动及饮食联合治疗的实验组.对比临床疗效.结果 干
目前,无线通信得到了快速发展,在人们的日常生活中也必不可少。而现下的电磁环境越来越复杂,致使通信设备之间的干扰更为严重,另外可用的无线频谱资源有限,频带拥挤的矛盾也日益突
本文主要研究Mie散射激光雷达信号消噪和反演气溶胶粒子谱分布。由于Mie散射激光雷达系统现有的缺陷,使得所测得的回波信号信噪比不高,严重影响对消光系数、水汽混合比和偏振
目的 探讨胰岛素泵强化治疗老年早期糖尿病肾病的效果.方法 将我院内分泌科2017年7月~2019年7月收治的92例老年早期糖尿病肾病患者随机均分为对照组(给予常规口服降糖药物治疗
目的 深入探究妊娠糖尿病对新生儿的影响.方法 借助SATI3.2统计摘要、题目中出现的医学相关词汇,导入SPSS21.0行多重分析、聚类分析,后经Citespace4.0最后分析并绘制关键词聚
我室研制、开发的重组双功能水蛭素RGD-Hirudins是一种双功能的水蛭素,既具有抗凝血酶的作用,又有阻断血小板聚集的作用。它属于基因工程的蛋白类药物,此类药物的临床应用与剂型
目的 分析急诊ICU收治的糖尿病酮症酸中毒预后因素.方法 选取我院2018年2月至2019年2月急诊ICU急诊的糖尿病酮症酸中毒患者75例进行研究,对所有患者的临床资料进行回顾性分析