慢性咳嗽患者诱导痰巨噬细胞Toll样受体2表达及甲基强的松龙对其表达的影响

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目的:探讨Toll样受体2(TLR2)在慢性咳嗽患者诱导痰巨噬细胞上的表达与气道炎症的关系以及甲基强的松龙对TLR2表达的影响。方法:收集2009年6月至2010年3月到泸州医学院附属医院呼吸科门诊就诊的慢性咳嗽患者40例,通过慢性咳嗽的解剖学诊断程序明确病因诊断,其中咳嗽变异性哮喘(CVA)患者15例、上气道咳嗽综合征(UACS)患者6例、嗜酸细胞性支气管炎(EB)患者8例和胃食管反流性咳嗽(GERC)患者11例;对照组为10名健康志愿者。用3%-5%氯化钠溶液进行痰液诱导,苏木精-伊红(HE)染色行痰细胞分类计数,贴壁法行巨噬细胞分离及培养,巨噬细胞分二组,一组未给予甲基强的松龙处理,另一组按400μg/ml的浓度给予甲基强的松龙处理,免疫荧光染色观察诱导痰巨噬细胞TLR2表达量及甲基强的松龙对其的影响,酶联免疫吸附法(ELISA)测定诱导痰上清液中IL-8和TNF-α浓度。采用SPSS 13.0统计软件,结果以均数±标准差(x)表示,组间比较采用q检验,相关分析采用直线相关分析;以P<0.05为差异有统计学意义。结果:1、CVA、UACS、EB和GERC各组患者诱导痰中细胞总数(3.41±1.10、2.62±0.55、2.58±0.65、2.73±0.48)×106/L与对照组(1.43±0.58)×106/L相比均明显升高,差异均有统计学意义(P<0.05);分类计数显示以上四组痰中巨噬细胞比例(35.1±4.3、39.7±6.3、38.4±4.2、43.1±5.3)%,与对照组(63.2±8.5)%相比均明显降低、中性粒细胞比例(52.2±6.3、57.7±6.4、51.6±3.8、53.9±5.7)%,与对照组(32.6±7.1)相比均明显升高,差异有统计学意义(P<0.05)。CVA和EB组患者嗜酸细胞比例(11.5±5.4、9.9±3.4)%明显高于UACS组(1.7±0.8)%、GERC组(1.2±0.4)%及对照组(0.5±0.3)%,差异有统计学意义(P<0.05)但CVA和EB两组间差异无统计学意义(P>0.05)。2、CVA、UACS、EB和GERC各组患者诱导痰上清液IL-8浓度(7.03±1.24、10.16±3.06、6.33±1.88、7.72±2.51)μg/L和TNF-a浓度(30.18±11.40、45.59±16.22、20.86±4.72、33.30±15.38)ng/L,分别与对照组(1.57±0.80)μg/L和(13.12±6.53)ng/L相比明显增高,差异均有统计学意义(P<0.05)。3、CVA、UACS、EB和GERC各组患者诱导痰上清液中IL-8浓度与痰中中性粒细胞数成正相关(R分别为0.628、0.816、0.769、0.733,P分别为0.012、0.048、0.026、0.016); CVA、UACS、EB和GERC各组患者诱导痰上清液中TNF-α浓度与痰中中性粒细胞数成正相关(R分别为0.579、0.865、0.730、0.755,P分别为0.024、0.026、0.040、0.0121。4、CVA、UACS、EB和GERC各组患者诱导痰巨噬细胞TLR2表达量与对照组相比均明显降低,甲基强的松龙可上调以上各组患者诱导痰巨噬细胞TLR2的表达。结论:1、不同病因的慢性咳嗽患者存在不同性质的气道炎症,咳嗽变异性哮喘和嗜酸细胞性支气管炎表现为以嗜酸细胞为主的多细胞炎症,上气道咳嗽综合征和胃食管反流性咳嗽表现为以中性粒细胞为主的多细胞炎症。2、CVA、UACS、EB和GERC慢性咳嗽患者诱导痰巨噬细胞存在TLR2表达下降,这与慢性气道炎症有关,甲基强的松龙可上调巨噬细胞TLR2的表达。
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