OsCesA1共表达基因启动子酵母单杂交载体构建和AtDF1转录因子功能研究

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在模式植物拟南芥中,调控次生细胞壁合成的转录因子已被广泛报道,且整个调控路径研究得较为清晰;但是调控初生细胞壁合成的转录因子,鲜有报道。本文筛选了与水稻初生细胞壁纤维素合成基因OsCesA1共表达的20个基因,构建了这20个基因的启动子,然后利用酵母单杂交技术和转录因子文库筛选,获得潜在的调控初生细胞壁合成的转录因子。同时,在拟南芥中,初步鉴定出了可能调控初生壁纤维素合成的转录因子AtDF1。结果显示,AtDF1直接调控AtCesA2、AtCesA3和AtCesA5参与种子粘液中纤维素的合成,而AtCesA2、AtCesA3和AtCesA5已被报道参与种皮表皮(Seed Coat Epidermal,SCE)细胞次生壁沉积和种子粘液中纤维素的合成。主要结果如下:1.利用PCR技术,设计20个基因启动子的引物,以水稻基因组为模板,克隆得到启动子序列,并构建了酵母单杂交的载体。2.突变体Atdf1种子粘液中果胶含量减少,且粘液中辐射状的纤维素含量也减少。3.突变体Atdf1的成熟种子种子叶发育畸形,且种子变小。4.AtDF1基因直接调控AtCesA2、AtCesA3和AtCesA5等基因
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