基于脾脏免疫物质探讨卫气节律性变化的实验研究

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天人相应思想是贯穿于整个《黄帝内经》的核心思想,人禀天地之气而生,来自于天地之间,最终将归于天地之间,其生、老、病、死无一不是受到天地阴阳季节变化的影响。天人相应思想是指导中医学预防、诊断、治疗疾病过程中的基础理论。天地阴阳四时季节变化影响人体五脏六腑阴阳变化,从而产生对人体生理、病理功能产生影响,尤其是对人体五脏的影响更是密切。本课题从“脾为之卫”“脾坚则脏安难伤”和卫气具有防御功能的角度出发,研究天地阴阳四时季节更替变化对大鼠脾脏相关免疫细胞因子的影响,探讨与脾脏相关的免疫细胞因子随天地阴阳四时季节更替的相应变化规律以及与卫气物质基础节律性变化的关系。为中医学天人相应理论的现代化研究及卫气物质基础研究,以及临床预防和治疗疾病提供理论依据和指导。目的:本实验研究以《内经》“天人相应”学说中天地阴阳四时季节气候变化对人体脏腑功能产生影响的论述为理论基础,通过观察四季SD雄性大鼠脾脏组织中免疫细胞因子变化情况,探讨与脾脏免疫相关的细胞因子随天地阴阳四时季节更替的相应变化规律以及与卫气物质基础节律性变化的关系。为中医学天人相应理论的现代化研究及卫气物质基础研究、临床预防和治疗感染性疾病提供理论依据和指导。方法:本实验研究选用体重(180-200)g的雄性健康SD大鼠,分别于每个节气前14天购于河北医科大学实验动物中心。将大鼠分为春分、夏至、秋分、冬至4组,每组10只。实验大鼠自由摄取水及普通鼠全价颗粒饲料,室温条件下饲养,接受自然光照,饲养至相应节气当天的上午9点-11点之间断头处死。解剖大鼠并取大鼠脾脏置于碎冰上,用手术刀割取1/3脾脏,经预冷生理盐水洗涤1次,滤纸吸干水分,在表面皿内用眼科剪剪碎后,置于电动玻璃匀浆机中,加生理盐水稀释,研磨l0s,停10s,重复研磨,直至脾脏组织全部研碎溶于生理盐水中,后离心取上清液。随后以放射免疫分析法检测大鼠脾脏组织中的白介素(IL-1、IL-2、IL-6)和肿瘤坏死因子-α(TNF-α)。酶联免疫法检测大鼠血脾脏组织中的IL-10,观察各指标的变化情况并进行统计分析。结果:1大鼠脾脏组织中白介素IL-1、冬至组与夏至组之间存在统计学差异(P<0.05)。春分、秋分二组之间差异无统计学意义。白介素IL-1水平的变化趋势是冬季组最低,夏季组最高,秋分组和春分组二者基本一致,并介于冬季组和夏季组之间。2大鼠脾脏组织中白介素IL-2、冬至组与夏至组之间存在统计学差异(P<0.05)。春分、秋分二组之间差异无统计学意义。白介素IL-1水平的变化趋势是冬季组最低,夏季组最高,秋分组和春分组二者基本一致,并介于冬季组和夏季组之间。3大鼠脾脏组织中白介素IL-6冬至组与夏至组之间存在统计学差异(P<0.05)。春分、秋分二组之间差异无统计学意义。白介素IL-6水平的变化趋势是冬季组最低,夏季组最高,秋分组和春分组二者基本一致,并介于冬季组和夏季组之间。4大鼠脾脏组织中IL-10水平,冬至组与夏至组之间存在统计学差异(P<0.05)。春分、秋分二组之间差异无统计学意义。大鼠脾脏组织中IL-10水平的变化趋势是冬季组最高,夏季组最低,秋分组和春分组二者基本一致,并介于冬季组和夏季组之间。5大鼠脾脏组织中TNF-α水平,按节气分组统计四个节气组大鼠脾脏组织中TNF-α水平差异无统计学意义。结论:1 IL-1,IL-2,IL-6在冬季组明显低于夏季组,冬至组与夏至组之间存在有统计学差异(P<0.05)。春秋之间无统计学差异。IL-10冬季组明显高于夏季组,冬至组与夏至组之间存在有统计学差异(P<0.05)春秋之间无统计学差异。TNF-α不存在季节性的差异。上述结果表明,上述结果说明大鼠脾脏组织相关免疫细胞因子水平在冬季节较低,这一结果在一定程度上印证了卫气随着一年四季的阴阳的变化而出现的节律性变化。同时为寻找卫气的物质基础的节律性变化提拱了一定依据。也为季节性发病的疾病的免疫学机制提供了一定的实验依据,对临床预防、诊断和治疗季节性发病的疾病具有指导意义。2实验结果表明大鼠脾脏相关免疫功能相关的细胞因子随季节更替产生一定变化,从免疫学角度在一定程度上佐证了“天人相应”学说机体随季节气候更替产生适应性调节和变化理论的科学性。
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