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重症急性胰腺炎(SAP)的发病机制迄今尚未完全阐明。研究表明,炎症细胞因子的过度激活与释放导致全身炎症反应成为SAP早期病程中的核心问题。胰腺微循环紊乱是除炎症因子外导致SAP发生和发展的另一重要机制。与一般组织微循环不同,胰腺其独特的解剖学模式特点决定了胰腺易发生缺血、坏死。环氧化酶-2(COX-2)可诱导中性粒细胞粘附,浸润,启动炎症反应;介导毛细血管损伤,通透性增加,引起胰腺微循环障碍。已证实COX-2在急性胰腺炎病程中起着重要作用,COX-2抑制剂对胰腺炎具有保护作用。COX-2基因上游信号通路具有组织特异性,不同组织细胞COX-2受不同信号通路调节。已有研究证实姜黄素能够降低炎性因子水平,减轻胰腺病理损害程度。关于姜黄素对SAP模型中COX-2蛋白表达及p38MAPK信号通路的影响国内外未见报道。目的:本实验通过观察SAP时p38MAPK信号通路的活性和COX-2蛋白表达,姜黄素处理后胰腺组织中两者的变化和两者之间的相关性,来阐明p38MAPK与COX-2在胰腺组织之间的关系以及姜黄素治疗SAP的机制。方法:本实验采用健康雄性SD大鼠54只,体重200～250g,随机分成三组:急性出血坏死性胰腺炎模型组(AHNP组)、姜黄素预处理组(CUR组)、假手术组(SO组),每组分3、6、12h三个观察时间点,每时间点各6只。采用5%牛磺胆酸钠(0.1ml/100g)逆行性胰胆管内加压注射建立AHNP模型。CUR组于术前2h腹腔内注射姜黄素溶液(200mg/kg),余组注射同等剂量的DMSO溶液。SO组大鼠麻醉开腹后,仅翻动胰腺组织数次即关腹。各组分别于术后三个观察时间点采用腹主动脉放血法将大鼠处死,观察胰腺大体炎症改变;经腹主动脉取血,采用全自动生化分析仪测定血清淀粉酶;取胰头部组织分成两部分:一部分放置于10%中性甲醛溶液中固定,用于病理检测及免疫组化法检测COX-2蛋白含量;另一部分立即放置于-80℃液氮罐中用于western blot法检测磷酸化p38MAPK(p-p38MAPK)蛋白含量。通过观察比较AHNP组和CUR组血清淀粉酶,胰腺组织病理学改变来判断姜黄素治疗SAP效果;通过观察比较AHNP组和CUR组COX-2、p-p38MAPK蛋白变化及两者之间的相关性来阐明两者在胰腺组织之间的关系以及姜黄素治疗SAP的机制。结果:1、胰腺大体变化:术后解剖发现:SO组胰腺呈均匀一致的粉红色,光泽度好;AHNP组大鼠胰腺呈暗红色,无光泽,表面水肿、出血,胰腺及网膜组织少量皂化斑,血性腹水形成。CUR组各观察时间点胰腺呈类似改变,但损害程度较AHNP组轻。2、胰腺组织病理学镜下评分:SO组组织病理学评分计为零;AHNP组三个观察时间点(3、6、12h)评分依次为4.40±0.19,5.63±0.47,6.65±0.73;CUR组三个观察时间点评分依次为3.92±1.13,4.37±0.48,5.05±1.14,两者评分在6h、12h两个观察时间点差异具有统计学意义(P<0.05)。3、血清淀粉酶变化: AHNP组( 5472.00±2414.04 , 6330.70±2674.20 ,5606.80±1752.47)和CUR组(4959.50±1626.93,3645.20±1344.67,3656.70±788.3)各观察时间点均明显升高,与SO组相比差异具有统计学意义(P<0.05);在6h、12h两个观察时间点CUR组与AHNP组相比具有统计学意义(P<0.05)。4、COX-2蛋白表达变化:SO组胰腺组织可见COX-2弱阳性表达,染成浅黄色;AHNP组可见较多腺泡细胞染成棕黄色,各观察时间点依次为8.45±0.68,8.78±1.31,10.10±1.22;CUR组可见较多腺泡细胞染成淡黄色,各观察时间点依次为6.83±1.45,5.88±1.49,6.30±0.72。三组COX-2蛋白相比,各观察时间点差异都具有统计学意义(P<0.05)。5、p-p38MAPK蛋白含量:SO组有少量蛋白表达;AHNP组蛋白含量明显增多,各观察时间点依次为0.65±0.10,0.43±0.13,0.29±0.11,与SO组相比,差异具有统计学意义(P<0.05);CUR组蛋白各观察时间点依次为0.45±0.12,0.30±0.08,0.22±0.04。与AHNP组相比,3h、6h两个观察时间点差异具有统计学意义(P<0.05)。6、相关性分析:AHNP组和CUR组胰腺组织病理学损伤程度与COX-2蛋白表达(r=0.699,p<0.01)、时间均呈正相关(r=0.585,p<0.01)。AHNP组和CUR组在三个观察时间点p-p38MAPK与COX-2呈正相关,相关系数分别为:0.786、0.823、0.866(p<0.01)结论:(1)姜黄素可以减轻胰腺组织病理损伤程度,对重症急性胰腺炎具有保护作用。(2)重症急性胰腺炎早期胰腺组织内即可出现COX-2及p-p38MAPK蛋白表达增加,提示COX-2及p38MAPK信号通路参与早期重症急性胰腺炎的发生发展。(3)姜黄素处理组及未处理组可见p-p38MAPK与COX-2蛋白表达呈正相关,提示姜黄素降低COX-2蛋白表达可能是通过抑制p38MAPK/NF-κB通路来起作用的。