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目的：观察2010年11月-2011年5月在天津市儿童医院住院的支原体肺炎(MPP)患儿,该组均行纤维支气管镜检并获得支气管灌洗液(BALF),提取目的DNA片段,经Nested-PCR快速诊断MP感染,再通过PCR-RFLP的方法对MP-P1基因分型,探讨MPP的P1黏附蛋白基因分型的表达及临床支气管镜检特点。方法：观察2010年11月-2011年5月在天津市儿童医院住院患儿符合MPP 46例,临床分为两组：普通型支原体肺炎(MPPG)和难治型支原体肺炎(RMPP)。本组均经纤维支气管镜检查并获得支气管灌洗液(BALF)。以细菌基因组DNA提取试剂盒提取DNA,设计针对MP的ADH3/ADH4的引物,以Nested-PCR技术扩增MP目的DNA片段。再以HaeⅢ限制性内切酶,HapⅡ限制性内切酶,采用(Restriction fragment length polymorphism, RFLP)限制性片段长度多态性分析PCR-RELP方法,对MP进行P1基因的分型。并测定部分MP-P1基因的核苷酸序列。将所测标本的核苷酸序列在Genebank中用BLAST与标准株M129的Pl基因比较,确定同源性。观察两组MPP的患儿行纤维支气管镜检的特点、进行分析及灌洗治疗。支气管狭窄明显的两例患儿行支气管镜下活检及病理。结果：1.对临床符合MPP诊断46例,提取支气管灌洗液(BALF)行Nested-PCR检测,Nested-PCR阳性20例,阳性率为43.4%。2.本组RMPP21例,Nested-PCR阳性12例；MPPG 25例中,阳性8例。(χ2=2.936,p=0.087),p>0.05两组无统计学差异。3.采用限制性片段长度多态性分析(PCR-RFLP)方法,对20例阳性标本MP的基因分型,均符合MP的P1基因I型。PCR检测的阳性标本部分核苷酸测序,将所测标本的核苷酸序列在Genebank中用BLAST与标准株M129的P1基因(序列号为M18639)比较,其同源性为99%。4. MPP 46例,年龄11月-13岁,平均(6.61±2.76)岁,6-9岁为20例(43.4%)。胸部X线表现为大叶肺实变(69.6%),肺门周围炎(21.7%),肺门周围及支气管周围均质或不均质阴影(17.4%),全肺野的弥漫性阴影(13%),胸腔积液(17.4%)肺不张(6.5%)。螺旋CT示：斑片状或大片阴影(60.9%),肺门或纵隔淋巴结肿大(21.7%)。5.支气管镜检改变：46例患儿行纤维支气管镜检,所有病例均见病变部位支气管黏膜充血水肿,可见黏性分泌物附着,支气管镜检下直视的病变部位与胸部X线及CT相符。主要表现为段支气管通气不畅(60.9%),叶或段支气管开口肿胀狭窄(26.1%),黏液栓致开口栓塞(13%),息肉样新生物致开口闭塞(10.9%),纵行皱褶(21.7%),管壁血管显露、走行粗重(13%),管壁黏膜小结节样突起(8.7%),腔脓性分泌物(10.9%)。其中,2例患儿因病情迁延,支气管镜直视下均发现支气管开口明显狭窄,行纤维支气管镜下活检并送病理检查,结果显示：光镜下显示支气管粘膜炎性改变。可见支气管粘膜炎性渗出,中性粒细胞浸润,另一患儿光镜下表现为支气管粘膜上皮增生,急慢性炎细胞浸润即大量的淋巴细胞及中性粒细胞浸润。结论：1、本研究通过对46例MPP患儿的BALF进行检测,46例患儿,Nested-PCR阳性为20例(43.4%)。Nested-PCR对MP感染具有快速诊断,阳性率可靠,特异性高,它可以作为临床MP感染早期诊断的金指标。2、本研究发现PCR-RFLP方法确定本组MPP病例为MP的P1-Ⅰ型。PCR-RFLP方法能够成功的将MP进行分型,确定MP流行区域的基因类型。3、本组MPP约占CAP的17.9%。6岁以上儿童为MP感染高发组。4、纤维支气管镜术有助于RMPP的诊断治疗及病情评估,肺泡灌洗治疗方法可以迅速改善儿童RMPP的临床症状,是MPP有效的治疗方法。