沙棘果化学成分分析及其抗氧化活性研究

来源 :新疆医科大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:lvyuxuan3652008
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目的:本实验对沙棘果(Hippophae rhamnoides L.fruits)进行化学成分检识并对沙棘果中主要成分进行定性定量分析。研究沙棘果化学抗氧化实验和细胞抗氧化活性,以期为沙棘应用于医药治疗提供相关数据。方法:1.通过颜色、沉淀及其他相关反应,对沙棘果中化学成分进行检识。2.采用紫外-可见分光光度计法测定沙棘果中总黄酮、总多酚、总糖含量;采用电位滴定法测定沙棘果中总有机酸含量。3.采用高效薄层色谱法(HPTLC)对沙棘果4种成分进行定性定量分析。4.建立沙棘果高效液相(HPLC)指纹图谱并采用一测多评法(QAMS)同时测定沙棘果中5种成分的含量。5.考察沙棘果体外抗氧化能力并进行综合分析。通过H2O2诱导Hep G2细胞损伤,建立细胞氧化损伤模型,考察沙棘果乙醇提取物对细胞中总抗氧化能力(T-AOC)、过氧化氢酶(CAT)、超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)及谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)活力的影响。结果:1.对化学成分进行初步研究结果表明沙棘果中含有糖苷类、黄酮类、酚类、鞣质类、氨基酸、多肽及蛋白质和有机酸类等化学成分。2.总成分含量测定结果表明沙棘果中总黄酮含量为8.50-45.17 mg/g;总多酚含量为12.36-50.95 mg/g;总糖含量为128.36-410.80 mg/g;总有机酸含量为10.14-36.77mg/g。3.HPTLC定性分析结果表明沙棘果中槲皮素Rf值为0.48±0.05,异鼠李素Rf值为0.64±0.05,苹果酸Rf值为0.59±0.05,奎宁酸Rf值为0.45±0.05,其方法学考察均符合相关规定。HPTLC定量分析结果表明沙棘果水解产物中槲皮素含量为57.48-295.17 mg/g、异鼠李素含量为27.56-238.22 mg/g、沙棘果中苹果酸含量为8.35-18.70 mg/g、奎宁酸含量为13.69-44.95mg/g。4.HPLC指纹图谱确定14个共有峰,指认了5个成分;聚类分析与主成分分析将10个不同产地沙棘果分成4类,偏最小二乘法判别分析筛选出导致沙棘果样品分类差异的7个主要色谱峰。QAMS结果表明在各自线性范围内,原儿茶酸、芦丁、槲皮素、山奈酚相对校正因子分别为0.984、0.957、0.993、0.994。10个不同产地沙棘果样品QAMS法计算值与实测值无显著差异。5.化学抗氧化结果表明沙棘果清除率均仅次于维生素C,说明沙棘果提取物对总抗氧化、DPPH自由基、ABTS阳离子自由基、·O2-、羟自由基、FRAP氧化能力在一定浓度范围内具有较好的剂量依赖性。细胞抗氧化结果表明沙棘果乙醇提取物能显著降低细胞中MDA含量,增加T-AOC、SOD、CAT、GSH-Px含量,说明10个产地沙棘果乙醇提取物有一定的保护细胞减轻氧化损伤的能力。结论:本课题通过HPTLC、HPLC定性定量分析了沙棘果中化学成分,并对其进行体外与细胞抗氧化活性研究,为沙棘果的化学成分分析以及今后进一步合理有效开发沙棘果资源提供了参考。
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