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目的冠状动脉粥样硬化性心脏病(Coronary Heart Disease,CHD)是由冠状动脉粥样硬化(Atherosclerosis,As)导致的慢性缺血性心脏病,其中不稳定型心绞痛具有斑块易破裂、病情进展快、死亡率高等特点。不稳定型心绞痛与炎症反应密切相关,该类患者治疗前后相关炎症因子的变化水平可以作为评估药物治疗作用的一部分。NF-κB信号通路作为炎症反应的重要部分,其指标变化具有指示性意义。血塞通软胶囊具有活血祛瘀、通脉活络的作用。为探索血塞通软胶囊治疗冠心病血瘀证患者中的抗炎作用与炎症信号通路NF-κB的关系,设计了临床及实验研究。通过观察信号通路NF-κB上的 NFKBIA mRNA、CARD11 mRNA 及 miR-155 与 SIRT1 mRNA 的表达变化,及通路下游IL-6、TNF-α、NF-κB等蛋白表达的变化,以探究血塞通软胶囊(三七总皂苷)的临床疗效以及对miR-155/NF-κB炎症信号通路的表达水平的影响。方法1.血塞通软胶囊干预不稳定型心绞痛血瘀证患者的临床研究招募2019年1月至2019年11月期间就诊于我院的患者,经冠脉造影确诊的并且符合纳排标准的冠心病不稳定型心绞痛血瘀证患者64例,采用密封信封按就诊顺序随机分为实验组和对照组。两组患者给予抗血小板治疗、降脂治疗等西医常规治疗,并根据合并症予以对症处理。实验组32例在西医常规治疗的基础上加服血塞通软胶囊;对照组32例在西医常规治疗的基础上加服血塞通胶囊模拟剂。治疗周期为1个月,治疗前后分别记录观察指标:冠心病血瘀证症状改善情况、西雅图量表、血瘀证积分量表、血脂变化、高敏C反应蛋白、血尿便三大常规和肝肾功能。并对观察指标进行统计学处理,用SPSS 21软件分析数据,用Graph Pad Prism 8.0.2作图。2.血塞通软胶囊对miR-155及NF-κB信号通路影响的实验研究选择经冠脉造影确诊的冠心病不稳定型心绞痛血瘀证患者35例,药物干预等同前,治疗周期1个月,于清晨空腹状态下抽取外周静脉血以提取总RNA,入组前后各1次。选择NF-κB信号通路相关的NFKBIA、CARD11、SIRT1、miR-155等指标,以及通路下游IL-6、TNF-α、NF-κB等蛋白表达的变化作为观察指标。用实时荧光定量聚合酶链式反应验证NF-κB信号通路上的相关分子NFKBIA mRNA、CARD11 mRNA、SIRT1 mRNA及miR-155在治疗前后的变化。用ELISA检测外周血血浆IL-6、TNF-α、NF-κB等蛋白表达的变化。用SPSS 21软件分析数据,用Graph Pad Prism 8.0.2软件作图。结果1.血塞通软胶囊干预不稳定型心绞痛血瘀证患者的临床研究本研究最终纳入患者64例,两组患者各32例,一般情况基线平稳,具有可比性。药物干预后,实验组冠心病血瘀证症状改善总有效率为87.5%,对照组总有效率为81.5%。西雅图量表变化统计分析:两组患者的躯体活动受限程度、心绞痛稳定状态、心绞痛发作频率均较前有所改善,除对照组治疗前后躯体活动受限程度无显著性差异(P>0.05),其他各组内前后比较均具有显著性差异(P<0.05)。血瘀证改善情况统计分析:试验组积分较对照组更低,提示:联合治疗和西医单纯治疗,均可以降低中医证侯积分,但联合治疗降低积分的效果更优。炎症指标分析:各组治疗前后的变化差异不具有统计学意义(P>0.05)。血脂变化统计学分析表明,治疗前后的变化差异不具有统计学意义(P>0.05)。两组患者治疗前后肝肾功能、血尿便三大常规指标等无明显差异(P>0.05),基本生命体征(心率、呼吸、体温、血压)无异常,表明药物的安全性良好。2.血塞通软胶囊对miR-155及NF-κB信号通路影响的实验研究miR-155的表达变化:实验组miR-155的表达水平上调了 2.05倍;对照组miR-155的表达水平上调1.57倍,实验组及对照组变化趋势一致,实验组变化幅度更大。实验前两组组间无明显差异(P>0.05),95%的可信区间,说明基线平稳,两组具有可比性,因此可以明确药物干预对miR-155的表达有促进作用。NFKBIA mRNA的表达变化:实验组NFKBIA mRNA的表达水平上调了 1.65倍;对照组NFKBIA mRNA的表达水平下调为原来的0.86倍,实验组及对照组变化趋势相反。实验前两组组间无明显差异(P>0.05),95%的可信区间,说明基线平稳,两组数据具有可比性。因此可以说明药物干预对NFKBIA mRNA的表达有促进作用。SIRT1 mRNA的表达变化:实验组SIRT1 mRNA的表达水平上调了 1.51倍;对照组SIRT1 mRNA的表达水平下调为原来的0.90倍,实验组及对照组变化趋势相反。治疗前两组组间无明显差异(P>0.05),95%的可信区间,说明基线平稳,两组数据具有可比性。因此可以说明药物干预对SIRT1 mRNA的表达有促进作用。CARD11 mRNA的表达变化:实验组CARD11 mRNA的表达水平下调为原来的0.78倍;对照组CARD11 mRNA的表达水平上调了 1.1倍。实验组及对照组变化趋势相反。两组治疗前组间无明显差异(P>0.05),95%的可信区间,说明基线平稳,两组数据具有可比性。因此可以明确药物干预对CARD11 mRNA的表达存在抑制作用。NF-κB、TNF-α、IL-6等蛋白分析结果:两组组内前后对比均有差异性(P<0.05),浓度变化呈下降趋势。TNF-α从均值变化趋势看,实验组疗效稍佳。结论血塞通软胶囊对冠心病不稳定型心绞痛血瘀证有较好的临床疗效。可以有效改善患者血瘀证症状,以及患者的躯体活动受限程度、心绞痛稳定状态、心绞痛发作频率,可以有效改善冠心病UA血瘀证患者的血瘀证积分且安全性良好。ELISA法证明了两组患者治疗后的炎症指标包括TNF-α、IL-6、NF-κB呈下降趋势,说明了药物干预具有抗炎作用,虽然组间差异的比较不具有统计学意义,但从均值水平看,实验组疗效效果稍好。PCR扩增检测基因表达水平变化中,NFKBIA mRNA、SIRT1 mRNA、miR-155的表达水平发生了上调,CARD11 mRNA的表达水平发生了下调。因此推测,活血药物血塞通软胶囊的抑制免疫、抗炎作用可能与上调miR-155的表达并下调其靶基因CARD11 mRNA、下调其靶基因SIRT1 mRNA的表达以干预下游NF-κB信号通路有关,也证实了 miR-155可能是三七总皂苷治疗不稳定型心绞痛血瘀证患者的一个作用靶点。