本课题分为4个部分，简述如下： 第一部分 软骨素酶和透明质酸酶致离体猪眼基底部玻璃体脱离的研究 目的： 体外观察比较两种酶对猪眼基底部玻璃体的效果，为下一步体内研究筛选理想的酶 方法： 取新鲜尸体猪眼，低温运回后水浴复温，将配制好的软骨素酶10U/ml，50U/ml和透明质酸酶200U/ml，800U/ml各0.1ml分别注入玻璃体腔，并设对照组，注入0.1mlPBS。37℃水浴15分钟和30分钟后，分别取眼球4％戊二醛和视网膜固定液固定，行病理切片HE染色检查和基底部扫描电镜及后极部透射电镜检查，观察基底部玻璃体情况及后极部视网膜细胞改变。 结果： 1、病理检查显示，大体标本和切片均见基底部玻璃体有部分液化、降解； 2、扫描电镜显示，软骨素酶50U/ml组和透明质酸酶800U/ml组均可见基底部玻璃体与对照组相比有显著减少； 3、透射电镜显示，透明质酸酶200U/ml组对猪眼后极部细胞器损害较其他组要轻； 结论：体外使用透明质酸酶和软骨素酶均可诱导猪眼基底部玻璃体脱离 第二部分 软骨素酶和透明质酸酶致离体人眼基底部玻璃体脱离的研究 目的： 体外观察比较两种酶对离体人眼基底部玻璃体的效果，为下一步体内研究筛选理想的酶 方法： 取新鲜尸体人眼5只，低温运回后水浴复温，将配制好的软骨素酶10U/ml，50U/ml和透明质酸酶200U/ml，800U/ml各0.1ml分别注入玻璃体腔，并设对照眼，注入0.1mlPBS。37℃水浴30分钟后，4％戊二醛固定24h后行基底部扫描电镜和后极部透射电镜检查。 结果： 1、扫描电镜显示，软骨素酶50U/ml和透明质酸酶800U/ml均可见基底部玻璃体与对照眼相比有显著减少； 2、透射电镜显示，透明质酸酶200U/ml对猪眼后极部细胞器损害较其他组要轻。 结论：体外使用透明质酸酶和软骨素酶均可诱导人眼基底部玻璃体脱离 第三部分 透明质酸酶眼内组织毒性的研究 目的： 通过向新西兰大白兔玻璃体腔注药后临床观察及辅助检查，得出对于透明质酸酶玻璃体腔注射的安全剂量范围。 方法： 取成年雄性新西兰大白兔65只，将配制好的透明质酸酶250U/ml、500U/ml、1000U/ml各0.05ml经玻璃体腔中央注射，于注药后6小时、第1天、第3天、第7天及第14天分别行裂隙灯、眼压、视网膜电图、UBM、角膜内皮照相、角膜内皮和晶状体上皮细胞HE染色、眼底照相、病理切片、后极部视网膜透射电镜检查，全面观察药物对眼组织各部的毒性及副作用。 结果： 1、临床和病理观察，可见对于兔眼玻璃体腔用药后出现晶状体混浊，视网膜出血和水肿，在1000U/ml组早期即出现； 2、眼压、ERG、UBM、角膜内皮照相、晶状体上皮细胞检查未见异常； 3、后极部透射电镜检查发现在1000U组较早就可出现细胞和细胞器的改变。 结论：体内使用透明质酸酶25U对于兔眼是安全的。 第四部分 基底部玻璃体注射透明质酸酶诱导兔眼前段玻璃体脱离的实验研究 目的： 以新西兰大白兔为模型，观察透明质酸酶其局部注入后在三个浓度下，五个时间点时基底部玻璃体的体内降解情况。 方法： 取成年雄性新西兰大白兔105只，将配制好的透明质酸酶250U/ml、500U/ml、1000U/ml各0.05ml分别经局部玻璃体腔注药和玻璃体腔中央注药，于注药后6小时、第1天、第3天、第7天及第14天分别行裂隙灯、注药侧及对侧UBM、病理切片、扫描电镜检查，观察基底部玻璃体情况。 结果： 1、大体标本及病理切片显示注药侧局部玻璃体液化明显，其中透明质酸酶500U/ml、1000U/ml组残余玻璃体量较对照组和低浓度组明显减少； 2、UBM显示在透明质酸酶1000U/ml组和500U/ml组分别于注药后1周和2周左右相继观察到基底部玻璃体部分脱离； 3、扫描电镜在高浓度组亦可观察到基底部玻璃体脱离，其发生的时间较UBM要早。 结论：使用局部玻璃体腔注药可以在局部诱导基底部玻璃体脱离。