论文部分内容阅读
目的:观察感染HSV-2的生殖器疱疹豚鼠角朊细胞mRNA和miRNA表达差异,探讨龙胆泻肝颗粒对感染HSV-2的生殖器疱疹豚鼠角朊细胞TLR通路相关的mRNA和miRNA的干预作用。方法:建立感染HSV-2的生殖器疱疹豚鼠模型并将造模成功的生殖器疱疹豚鼠随机分成3组,分别为龙胆泻肝组、ACV组、生殖器疱疹组,以15只正常豚鼠作为对照,先分别切取生殖器疱疹组、正常对照组豚鼠外阴上皮细胞,再分离RNA冷冻保存。龙胆泻肝组、ACV组经龙胆泻肝颗粒和ACV治疗后再切取外阴上皮细胞,分离RNA,再统一进行RNA测序及数据分析。观察感染HSV-2的生殖器疱疹豚鼠角朊细胞mRNA和miRNA的表达谱及其与正常组的表达差异,以及mRNA和miRNA表达的相互关系。观察龙胆泻肝颗粒对感染HSV-2的生殖器疱疹豚鼠角朊细胞的TLR通路相关的m RNA和miRNA的表达变化。结果:1.本研究共测序了424个miRNA和9336个基因,通过数据过滤和基因组注释,随后鉴定了364个miRNA和4130个基因。与正常组相比,HSV-2感染组总共105个miRNA上调,141个下调;而798个基因上调,503个下调,故与正常组相比,感染HSV-2的角朊细胞mRNA和miRNA表达有差异。2.感染HSV-2的生殖器疱疹豚鼠角朊细胞与TLR通路相关的mRNA和miRNA的表达差异。基因与TLR通路有关的mRNA受到mi RNA的调控。与正常对照组比较,HSV感染后豚鼠与TLR(TLR1,TLR3,TLR5,TLR9,TRAF6和TRIF)通路有关的角朊细胞mRNA经量聚合酶链反应表现出表达水平的降低(P<0.05);而与TLR通路有关的角朊细胞miRNA(miR-592,miR-1245b-5p,miR-150,miR-342-5p,miR-1245b-3p和miR-124)的表达水平增加(P<0.05)。3.龙胆泻肝颗粒使生殖器疱疹豚鼠与TLR(TLR1,TLR3,TLR5,TLR9,TRAF6和TRIF)通路有关的角朊细胞mRNA的表达水平增加,而与TLR通路有关的角朊细胞mi RNA(miR-592,miR-1245b-5p,miR-150,miR-342-5p,miR-1245b-3p和miR-124)的表达水平下降。且龙胆泻肝颗粒的干预效果明显优于ACV。结论:感染HSV-2的生殖器疱疹豚鼠角朊细胞mRNA和miRNA表达有差异,且角朊细胞miRNA与mRNA的表达呈负相关,龙胆泻肝颗粒对感染HSV-2的生殖器疱疹豚鼠角朊细胞TLR通路相关的m RNA和miRNA有干预作用。