【摘 要】
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研究目的:心脏房间隔缺损(Atrial Septal Defect,ASD)是最常见的先天性心脏病之一,约占先天性心脏病13-18%。传统ASD封堵材料以镍钛合金为主,长期研究表明镍钛合金植入增加了心律失常,血栓等并发症的发生风险。为了开发可用于ASD封堵的生物可降解材料,使其在缺损部位完成内皮化后被机体完全吸收,减少对人体的长期不良影响,目前,在组织再生和修复领域已有大量研究,但尚无突破性进展。
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研究目的:心脏房间隔缺损(Atrial Septal Defect,ASD)是最常见的先天性心脏病之一,约占先天性心脏病13-18%。传统ASD封堵材料以镍钛合金为主,长期研究表明镍钛合金植入增加了心律失常,血栓等并发症的发生风险。为了开发可用于ASD封堵的生物可降解材料,使其在缺损部位完成内皮化后被机体完全吸收,减少对人体的长期不良影响,目前,在组织再生和修复领域已有大量研究,但尚无突破性进展。因此,本研究旨在探究生物可降解材料聚丁二酸丁二醇酯(Poly(1,4-butylene succinate),PBS)与壳聚糖(Chitosan,CS)复合材料采用3D打印技术制作ASD补片的可行性及其生物相容性。研究方法:通过熔融共混的方法制作PBS/CS复合材料,对材料进行傅立叶变换红外吸收光谱(Fourier Transform Infrared Spectrum,FTIR)、扫描电镜(Scanning Electron Microscope,SEM)、差示扫描量热分析(Differential Scanning Calorimetry,DSC)、水接触角测试,比较加入不同比例CS后的PBS材料表面形貌、热学性能以及亲水性差异;通过热熔沉积3D打印评估PBS/CS共混材料制作房间隔缺损补片的可行性;鬼笔环肽染色细胞骨架染色评估PBS/CS材料对小鼠胚胎成纤维细胞系NIH/3T3形态的影响,ROS检测细胞内氧化应激水平,CCK-8检测细胞增殖以及采用Annexin V-FITC试剂盒检测细胞凋亡;最后,进行SD大鼠体内植入实验,组织切片HE染色观察植入部位组织炎性反应程度。结果:成功制备出PBS/CS熔融共混材料;FTIR、SEM结果表明PBS与CS具有相容性,加入10%的CS在PBS中分散相对均匀;DSC结果证实CS的加入可改变PBS的热性能,提高PBS的结晶度,同时略微降低PBS的熔融温度;CS的加入改善了PBS的亲水性,随着CS加入量增多,水接触角减小15-20%,说明PBS/CS复合材料亲水性增加;3D打印出PBS/CS房间隔缺损补片,补片孔径一致,边缘光滑,对折后可恢复原状,但由于材料的结晶速率较低,打印出的补片与理论尺寸存在偏差,实际补片的孔隙值减小;与正常对照相比,PBS/CS材料浸提液培养的细胞在形态、细胞内氧化应激水平、细胞增殖及凋亡上均无统计学差异;组织切片HE染色显示,实验组植入部位早期组织炎性反应与对照组无明显差异,植入12周后材料被组织完全包裹,细胞攀附良好。材料植入24周后可观察到材料体积有所减少,说明该材料部分降解。结论:PBS与CS具有一定的材料相容性,CS的加入改善了PBS的热性能和亲水性,通过3D打印技术将PBS/CS共混材料制作成房间隔缺损补片是可行的,并且体内和体外实验显示该材料无明显生物毒性。本研究初步完成PBS/CS可降解材料作为心脏补片的材料表征测试和生物相容性测试,为进一步研究该复合材料的机械性能和动物体内原位实验提供依据。
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