【摘 要】
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背景及目的肺癌是世界上发病率及死亡率均最高的恶性肿瘤,全球每年约有180万的新发肺癌病例,占肿瘤发病率的13%。尽管诊断技术、手术及化学治疗和放射治疗技术有长足的发展,非小细胞肺癌（NSCLC）患者的5年生存率仍不乐观。放射治疗是通过电离辐射导致DNA损伤,有类似手术切除肿瘤组织的效果,其在肿瘤治疗中有重要地位。现阶段针对个体的基因治疗已成为研究热点,使得针对肺癌发生的基因的靶向治疗具有重要的意义
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背景及目的肺癌是世界上发病率及死亡率均最高的恶性肿瘤,全球每年约有180万的新发肺癌病例,占肿瘤发病率的13%。尽管诊断技术、手术及化学治疗和放射治疗技术有长足的发展,非小细胞肺癌（NSCLC）患者的5年生存率仍不乐观。放射治疗是通过电离辐射导致DNA损伤,有类似手术切除肿瘤组织的效果,其在肿瘤治疗中有重要地位。现阶段针对个体的基因治疗已成为研究热点,使得针对肺癌发生的基因的靶向治疗具有重要的意义。在此基础上,如何将基因的靶向治疗与放射治疗相结合,提高射线对肿瘤细胞的杀伤能力,最终为患者的生存带来获益。脂肪酸合成酶（FASN）是长链脂肪酸从头合成的关键酶,具有组织分布特异性和特殊的酶活性,在脂肪酸的合成与代谢中有重要的作用。由此可推断其在肿瘤的发生发展、侵袭转移及对药物和射线抵抗耐受等方面也有重要的作用。越来越多的研究证实:在多种肿瘤细胞中FASN的过表达与预后呈负相关,最终导致治疗抵抗。本研究旨在探讨FASN-sh RNA对NSCLC的生物学行为及对放射治疗敏感性的影响。方法首先构建慢病毒介导的FASN-sh RNA的干扰质粒,转染入人NSCLC A549细胞,得到低FASN表达的稳定转染细胞,通过Puro筛选并建立稳定表达A549细胞株,并进行X线照射。采用real-time PCR和Western Blot技术检测NSCLC A549细胞系中FASN m RNA和蛋白干扰效果;通过克隆形成实验检测其对放射敏感性的影响;采用CCK-8法检测细胞增殖活性;使用流式细胞仪检测细胞的凋亡以及周期分布情况;使用Western Blot法检测A549细胞系中DNA依赖性蛋白激酶（DNA-dependent protein kinase,DNA-PKcs）DNA-PKcs蛋白水平的表达;探讨FASN下调后,DNA-PKcs活性及对放疗诱导的DNA双链断裂修复过程的影响。结果成功的构建了2个sh RNA表达载体p SIH1-H1-FASN#3072和p SIH1-H1-FASN#7377,并筛选出抑制效果最佳的表达载体转染A549细胞,得到稳定表达细胞株。Real-time PCR和Western blot结果FASN-sh RNA可以抑制A549细胞中FASN m RNA和蛋白的表达;同时使A549细胞的放射敏感性下降;细胞的增殖活性明显减弱;放射诱导后的细胞凋亡增加,细胞周期中G2期细胞比例升高;FASN下调后细胞损伤修复减少,同时DNA-PKcs的表达明显减少。结论FASN的表达与NSCLC的放射敏感性呈负相关。下调FASN减少放疗引起的G2期阻滞;下调FASN增加放疗引起的凋亡;下调FASN降低DNA-PKcs的表达,减弱A549细胞修复DNA双链断裂的能力;下调FASN的表达,可能通过调节DNA-PK参与到DNA的损伤修复中,从而降低细胞的DNA损伤修复能力。
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喉鳞状细胞癌（LSCC,Laryngeal squamous cell cancer）具有高度侵袭性,是一种严重威胁人类生命健康的恶性肿瘤。长链非编码RNA（Lnc RNA,Long non-coding RNA）,长度大于200nt,具有复杂的生物学功能。研究发现Lnc RNA H19在多种肿瘤疾病的发生及发展中发挥重要的作用,然而H19在喉鳞状细胞癌中如何发挥作用尚未见报道,因此我们想研究H1
背景及目的急性胰腺炎（acute pancreatitis,AP）是一种常见的外科急腹症,由于缺乏特异性的治疗药物及方法,AP的临床治疗在当今生物医学高速发展的大背景下,仍是各位同道所共同面临的一大难题。AP致病的潜在机制尚未完全阐明,长久以来,AP发病早期的两项特征性改变,即腺泡细胞内大量空泡的堆积及胰酶的提前激活,一直是AP研究的热点。近年来,多项报道提示AP发病早期腺泡细胞内的空泡是自噬源性
背景及目的在各临床分期非小细胞肺癌（Non-small cell lung cancer,NSCLC）患者治疗方案中,放疗是重要的局部治疗手段。但是部分患者在接受放疗后会发生放射性肺炎（Radiation pneumonia,RP）。非小细胞肺癌患者放射性肺炎发病率很高,约有10%-37%的非小细胞肺癌患者在放疗后发生放射性肺炎,并且部分患者最终因此导致死亡,而目前没有较明确的预测肺癌患者放射性肺
背景及目的非小细胞肺癌（NSCLC）是全世界癌症死亡的主要原因。越来越多的研究表明长非编码RNA（lnc RNA）广泛参与NSCLC的发生和进展。lncRNA HOTTIP已被鉴定为几种人类癌症的致癌基因,但其在NSCLC中的作用仍然未知。本研究旨在确定HOTTIP在NSCLC中的表达和功能;HOTTIP、HOXA13在非小细胞肺腺癌细胞系A549中对细胞迁移、增殖、凋亡的影响。方法使用RT-PC
背景及目的乳腺癌大多数是雌激素依赖性的,luminal型乳腺癌较其他类型复发风险低,但仍有少数患者出现复发转移。对于此类患者预后目前缺乏有效的预测指标。许多研究报道外周血白细胞数量可以大致反应人体的免疫状态。一些血常规参数可以作为结直肠癌、肺癌、胃癌、肝癌患者的独立预后指标。目前这些外周血常规参数是否与luminal型乳腺癌患者预后密切相关,尚缺乏相关的临床研究。本研究旨在luminal型乳腺癌患
背景及目的血友病A是一种临床最为常见的X连锁隐性遗传性出血性疾病,由F8基因突变而导致凝血因子VIII蛋白量的异常或功能异常。F8基因突变谱广泛,包括无义和错义突变（59.83%）、剪切位点突变（6.72%）、小的缺失和插入（22.46%）、大缺失（9.18%）、大的插入/复制（1.12%）、复杂重组（0.52%）和调节异常（0.17%）。此外,45%和2-5%的严重的血友病A病例分别是由内含子2
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背景及目的抑郁症病因复杂,其发病机理尚不完全清楚,抑郁症的发病并不是简单地通过神经递质的异常改变产生的,而是通过细胞内复杂的信号转导发挥作用的。既往有研究证实CREB与抑郁症发病机制及抗抑郁药起效过程存在显著相关性,那么如果存在能够直接、快速激活CREB的信号通路,将会成为抑郁症发病中的关键通路,而电压门控钙通道1.2亚型（Caveolin-1.2,Ca V1.2）-钙/钙调蛋白依赖激酶4（Cal
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