肥胖对脓毒症预后的影响及其免疫调控作用研究

来源 :浙江大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:huawei_2009
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第一部分肥胖对脓毒症患者预后影响的荟萃分析目的:临床上肥胖对脓毒症患者预后的影响仍存在争议。体质指数(Bodymass index,BMI)常被用来衡量肥胖程度,我们通过荟萃分析比较脓毒症患者中,不同程度的肥胖,超重(25 kg/m2<BMI ≤29.9 kg/m2),肥胖(30 kg/m2<BMI≤39.9kg/m2)和极度肥胖(BMI>40 kg/m2)与其预后的关系。方法:从以下的数据库检索肥胖和脓毒症相关的临床研究:PubMed,Embase,Web of Science,Cochrane Library,,另外还在临床试验注册中心(clinicaltdals.gov)进行相关检索,检索时间截止为2016年12月1日。结果:共纳入符合要求的8篇临床研究,病人总数为9696人。荟萃分析的结果显示与正常体质指数(18.5 kg/m2<BMI≤ 24.9 kg/m2)相比,BMI>25 kg/m2患者死亡率降低(风险比=0.81;95%可信区间,0.74-0.89,P<0.0001)。在亚组分析中,超重患者死亡率更低(风险比=0.87;95%可信区间0.77-0.97,P=0.02),肥胖和极度肥胖患者死亡率与正常体质指数的患者相比无统计学差异。结论:在脓毒症患者中,与正常体质指数患者相比,超重患者具有较低的死亡率,肥胖和极度肥胖患者没有显著性差异。第二部分高脂微环境对巨噬细胞免疫功能的影响目的:巨噬细胞识别、吞噬和杀伤病原微生物,并且可以产生和分泌大量促炎/抑炎的细胞因子,从而在脓毒症中发挥重要的免疫调节作用。肥胖患者机体处于能量过剩,脂肪细胞有限的空间无法储存不断增多的游离脂肪酸,会发生肥大、死亡。死亡的脂肪细胞破裂后释放出细胞质中的脂肪酸进入血液,甚至在肝脏或其他组织中沉积。本部分使用棕榈酸(Palmitic acid,PA)刺激巨噬细胞,体外模拟肥胖时巨噬细胞在游离脂肪酸刺激下的状态,研究高脂环境下,巨噬细胞免疫功能的影响及在LPS刺激下的炎症因子表达水平。方法:体外分离培养小鼠骨髓来源巨噬细胞(Bone Marrow-Derived Macrophage,BMDMs),用不同浓度的 PA(0.1 mM、0.25 mM、0.5 mM、1 mM)分别刺激 12 h后,加入荧光微球孵育1 h,采用荧光显微镜及流式细胞仪检测BMDMs吞噬功能;不同浓度PA及LPS(100ng/ml)刺激4h后,采用定量聚合酶链反应(Polymerase chain reaction,PCR)的方法检测 BMDMs IL-6、IL-1 β 及 IL-10 mRNA 表达水平;不同浓度的PA刺激BMDMs 24 h后,采用流式细胞仪和荧光显微镜检测BMDMs死亡的情况。结果:高浓度PA与BMDMs共孵育12 h,可以明显抑制巨噬细胞的吞噬功能,而且呈现PA浓度依赖性;不同浓度PA及LPS共孵育4h,与对照组相比,0.1 mM PA抑制巨噬细胞炎症因子IL-6和IL-1β的表达,而1mM PA促进巨噬细胞炎症因子IL-6和IL-1β的表达,但抑炎因子IL-10的表达无明显变化。0.5 mM或1 mM的PA与BMDMs共孵育24 h可以引起巨噬细胞凋亡和焦亡水平增加。结论:高浓度PA明显抑制巨噬细胞吞噬功能,且诱发巨噬细胞发生凋亡和焦亡;低浓度PA抑制巨噬细胞炎症因子IL-6和IL-1β的表达,而高浓度PA促进巨噬细胞炎症因子IL-6和IL-1β的表达。
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