研究背景与目的:肝癌是居全球第五位的常见肿瘤,也是与癌症相关的第三位致死病因,每年新增的患者将近五十多万。80%发生在发展中国家。而我国是肝癌发病率和致死率最高的国家之一。在肿瘤的发生、发展和转移过程中,大多数实体瘤都不同程度的依赖于肿瘤血管的形成。由于肿瘤血管形成对肿瘤发生发展起到关键性的作用,抗肿瘤血管生成靶向治疗在肿瘤治疗方面得到了足够的重视。而内皮细胞是肿瘤血管形成中的主要组成成分,目前抗血管生成靶向治疗的研究的新热点突出在寻找肿瘤内皮细胞特异性表达的蛋白靶位。本研究是采用中国协和医科大学肿瘤研究所抗体工程实验室首创的“功能性抗体库筛选肿瘤相关的功能性基因”的新技术,重点研究了抗人肝癌血管内皮细胞的单抗,并在体内外筛选鉴定了功能性单克隆抗体,初步确定了某些功能性单抗识别的功能性蛋白的分子量,为分离获得人肝癌血管内皮细胞相关的功能性基因奠定了重要的基础。方法:本研究根据对前期的免疫细胞化学、免疫组化研究结果获得的119株抗人肝癌血管内皮细胞的单克隆抗体进行了体内外功能的检测、分析和鉴定。首先采用MTT法检测了119株单抗对人肝癌血管内皮增殖的作用。采用内皮细胞成管实验检测分析了119株单抗对人肝癌血管内皮细胞成管功能的影响。在此基础上选择在体外明显抑制人肝癌血管内皮增殖的16株单抗在中国医学科学院肿瘤研究所抗体工程室建立的“人源化