【摘 要】
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壳聚糖及其衍生物作为非病毒载体在基因治疗中显示出了良好的应用前景。叶酸受体由于其在多种肿瘤细胞表面高表达的特点使其成为一种重要的抗肿瘤靶向位点。本课题制备叶酸(F
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壳聚糖及其衍生物作为非病毒载体在基因治疗中显示出了良好的应用前景。叶酸受体由于其在多种肿瘤细胞表面高表达的特点使其成为一种重要的抗肿瘤靶向位点。本课题制备叶酸(FA)偶联羟丙基壳聚糖(HPCS),探索一种有效且靶向的反义寡核苷酸药物载体,使所制备药物能够有效地降低肿瘤细胞中P-gp糖蛋白的表达,从而抑制肿瘤细胞多药耐药性。通过对壳聚糖羟丙基取代程度不同的比较,课题最终确定所制备纳米药物其粒径大小约为181nm,包埋率为89.58%,同时纳米药物在24h内缓释效果为40%左右。FA-HPCS-asODNs纳米药物在KB-A-1细胞中显示出了较高的细胞毒性。同时纳米药物的抗肿瘤效果在KB-A-1肿瘤移植裸鼠中得以体现,相比于裸asODNs而言,纳米药物对肿瘤生长的抑制效果达到35%。在对于MDR机理的研究过程中,纳米药物分别在体外和体内实验中都体现出良好的抑制mdrl和P-gp效果。其中纳米药物对KB-A-1细胞内mdrl和P-gp蛋白表达的抑制效果分别为63%和90%左右。体内实验表明,裸asODNs以及纳米药物分别在mdrl基因表达水平上抑制了23.56%和47.13%,而在P-gp蛋白表达水平上则分别抑制了27.08%和45.83%左右。同时,体内靶向性实验表明,纳米药物可以有效地特异性结合于高表达叶酸受体的肿瘤细胞表面。综上所述,这些结果都说明使用靶向性的反义寡核苷酸纳米药物将在克服肿瘤细胞多药耐药性的研究中有着良好的应用前景。
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