【摘 要】
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目的:脑出血、创伤性脑损伤、中枢神经系统退行性疾病均会导致神经元丢失和死亡,致使运动、感觉、认知能力下降甚至丧失。中枢系统中存在神经干细胞(neural stem cells,NSCs),NSC是一种能够自我更新,且具有分化为大量特化的中枢神经系统细胞的能力的细胞。实验证明,NSCs移植对缺血性脑卒中、外伤性脑损伤、神经退行性疾病等多种中枢神经系统疾病均有积极的治疗效果。研究表明电刺激产生的局部表
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目的:脑出血、创伤性脑损伤、中枢神经系统退行性疾病均会导致神经元丢失和死亡,致使运动、感觉、认知能力下降甚至丧失。中枢系统中存在神经干细胞(neural stem cells,NSCs),NSC是一种能够自我更新,且具有分化为大量特化的中枢神经系统细胞的能力的细胞。实验证明,NSCs移植对缺血性脑卒中、外伤性脑损伤、神经退行性疾病等多种中枢神经系统疾病均有积极的治疗效果。研究表明电刺激产生的局部表面电荷能够促进神经纤维生长、诱导神经细胞分泌各种因子其中包括神经营养因子,此外还发现电刺激可促进神经干细胞向神经元分化。然而,大多数电刺激装备需要的外部电源或反复周期性充电,并且需要将较大的电流或电压转换为适用于机体刺激的工作电流或电压后,才能进行后续的电刺激实验或治疗,这些都限制了电刺激的应用范围。本研究使用一种自驱动的电刺激装置,该装置可将机械能转化为电能,其产生的电能可直接应用于神经干细胞刺激,并促进神经干细胞向神经元分化同时抑制其向胶质细胞分化。方法分离培养神经干细胞每7天传代,使用第2至第3代神经干细胞接种于6孔板中,接种后第二天将自驱动发电机产生的电流通过特制的细胞电刺激器传输至孔板中进行电刺激,在接种后第7天,即刺激5天后收取细胞样品,使用CCK8、q PCR、Western Blot、细胞免疫荧光等技术对细胞活性、神经元及星形胶质细胞细胞标志性基因及蛋白的表达进行检测。后期使用Image J计数后进行统计分析经元比例。结果:在自驱动电磁发电机输出电流为2m A的条件下刺激5天后,神经干细胞分化为神经元的标志性基因MAP2、TUJ1、标志性蛋白、神经元比例明显增高,而星形胶质细胞分化相关基因GFAP、星形胶质细胞标志性蛋白及星形胶质细胞比例均明显降低。结论:实验结果表明,自驱动电磁发电机输出的电能能够促进神经干细胞向神经元分化同时能够抑制其向星形胶质细胞分化。有文献报道电刺激可促进神经元突起长度的增加,神经元突起数量及长度增加可促进神经元之间相互连接形成神经网络,促进神经系统的修复。上述结果为自驱动发电机应用于神经系统创伤性疾病、神经退行性疾病的治疗提供理论基础。
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