【摘 要】
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[目的]用无血清悬浮培养法从人绒毛膜癌JEG-3细胞系中分离培养绒毛膜癌干细胞样细胞,对其进行体内鉴定,并对其进行化疗药物敏感性的初步研究。[方法](1)无血清培养基悬浮培养
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[目的]用无血清悬浮培养法从人绒毛膜癌JEG-3细胞系中分离培养绒毛膜癌干细胞样细胞,对其进行体内鉴定,并对其进行化疗药物敏感性的初步研究。[方法](1)无血清培养基悬浮培养富集法分离培养JEG-3干细胞样细胞;(2)裸鼠体内成瘤实验观察JEG-3干细胞样细胞及JEG-3亲本细胞两组细胞的体内成瘤能力;(3) Transwell体外侵袭实验观察两组细胞的侵袭能力;(4) Real-time PCR检测两组细胞中OCT-4、NANOG的表达水平;(5)MTT法观察两组细胞在不同浓度下对依托泊苷、氟尿嘧啶和甲氨蝶呤敏感性的变化。[结果](1)JEG-3可在SFM中存活、增殖,形成悬浮生长具有自我更新能力的肿瘤干细胞样细胞,并可连续传代;(2)JEG-3干细胞样细胞较JEG-3亲本细胞具有更高致瘤性;(3)JEG-3干细胞样细胞透过膜的细胞较JEG-3亲本细胞多,JEG-3干细胞样细胞较JEG-3亲本细胞具有更强的侵袭能力(P值=0.006,P值<0.05);(4)人绒癌JEG-3干细胞样细胞OCT-4、NANOG mRNA的表达均高于JEG-3亲本细胞,差异具有显著统计学意义(P<0.05);(5)在不同浓度的化疗药物作用下,人绒癌JEG-3干细胞样细胞比JEG-3细胞存活率更高,更具有耐药性,差异具有显著统计学意义(P<0.05)。[结论]1.人绒毛膜癌JEG-3干细胞样细胞较JEG-3细胞具有更高的致瘤能力及侵袭能力;2.人绒毛膜癌JEG-3干细胞样细胞对化疗药物具有显著耐药性;且其高表达OCT-4、NANOG,为绒癌的靶向治疗提供了靶点。
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