siRNA沉默hIAP-2基因表达对肝癌细胞SMMC-7721增殖与侵袭能力的影响

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目的:合成凋亡抑制蛋白(hIAP-2)的siRNA,观察其对SMMC-7721细胞增殖和侵袭能力的影响。方法:化学合成三条hIAP-2-siRNA干扰片段并用脂质体法转染SMMC-7721细胞,同时设阴性体对照。实时荧光定量PCR和western blotting检测hIAP-2-siRNA作用后SMMC-7721细胞中hIAP-2mRNA和蛋白的表达,MTT检测SMMC-7721细胞增殖能力变化,AV-PI流式细胞术检测各组SMMC-7721细胞转染48h后的凋亡率变化,Transwell检测细胞侵袭能力的变化。结果:Q-PCR及Western blotting检测显示3条siRNA均能有效抑制hIAP-2mRNA及蛋白表达(P<0.05),以siRNA1作用效果最显著(P<0.05)。MTT检测显示hIAP-2-siRNA转染24、48和72h后的SMMC-7721细胞的增殖受到显著抑制(P<0.05);流式细胞术检测结果显示hIAP-2-siRNA转染SMMC-7721细胞后凋亡率增加(p<0.05)。Transwell检测结果显示沉默hIAP-2mRNA后,SMMC-7721细胞的侵袭能力显著降低(p<0.05)。结论:hIAP-2-siRNA可明显抑制肝肿瘤细胞SMMC-7721的增殖,促进SMMC-7721肝癌细胞的凋亡,降低其侵袭能力。
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