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小尾寒羊产羔率高，平均产羔率为281.9％，而吐鲁番黑羊是典型的产单羔绵羊，单羔率为99.3％。多胎性状是绵羊的重要经济性状之一，是决定繁殖率的关键因素之一。然而，多胎性状是受多基因控制的且遗传力低，利用传统的选择方法培育新的高繁殖率品种是相当繁琐的。构建小尾寒羊和吐鲁番黑羊卵巢组织miRNA表达谱，筛选与绵羊多胎性状相关的miRNAs，为培育新高繁殖率品种提供新的方向。 本研究采用高通量测序技术，构建了小尾寒羊和吐鲁番黑羊发情期、间情期四个卵巢组织样品的miRNA cDNA库。结果表明:四个样品组织分别获得了11467290、10667271、11133001、10793522条纯净reads;对这些reads进行长度分布统计，在22nt处达到峰值;采用miRDeep程序对测序结果进行分析，在四个卵巢样品中分别获得194、191、188、187个miRNAs，其中已知miRNA分别为135、134、136、129个，未知miRNA分别为59、57、52、58个;oar-miR-99a是小尾寒羊间情期表达量最为丰富的miRNA，而oar-miR-143是小尾寒羊发情期、吐鲁番黑羊发情期和间情期三个样品中表达量最丰富的miRNA。通过对同一个体发情期和间情期表达的miRNAs进行比较，筛选出小尾寒羊发情期与间情期中3个显著差异表达的miRNAs（log2Foldchange＜-1），吐鲁番黑羊发情期与间情期存在19个显著差异表达miRNAs（log2Foldchange＜-1），对其靶基因进行GO富集和KEGG通路分析，推测差异表达的miRNAs通过代谢和免疫途径调控绵羊相关的繁殖过程;通过多胎与单胎羊之间的比较，筛选出小尾寒羊与吐鲁番黑羊间情期之间34个差异表达的miRNAs（log2Foldchange＜-1），推测这些miRNAs与绵羊多胎性状相关，为培育新的高繁殖率品种提供新的方向和思路。 采用荧光素酶报告分析实验对miR-150、miR-27a进行靶基因的验证。试验结果表明:StAR基因为miR-150的一个靶基因，而CREB1不是miR-27a的靶基因。StAR为固醇类激素生成过程中重要的限速酶，推测miR-150是通过作用于StAR影响孕酮的生成，从而对绵羊的卵泡发育、排卵、排卵数、产羔率产生调节作用。而miR-27a不是通过CREB1调节绵羊的繁殖活动。 利用实时荧光定量PCR检测oar-miR-23b、oar-miR-200b、oar-miR-150、oar-miR-19b、oar-miR-194、oar-miR-200a、oar-miR-27a、oar-miR-143在小尾寒羊和吐鲁番黑羊间情期与发情期4个卵巢样品中的表达量，试验结果表明:实时荧光定量PCR与高通量测序表达量相同，验证了高通量测序的准确性。