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本论文研究了在妊娠后期日粮中添加N-氨甲酰谷氨酸(N-carbamylglutamate,NCG)对母猪繁殖性能的影响,并对其作用机制进行了初步探讨。
1、妊娠后期日粮中添加不同水平NCG对母猪繁殖性能的影响
选用妊娠80天的长大母猪32头,随机分成4组(对照组和试验组1、2、3),每组8个重复。对照组饲喂基础日粮,试验组在基础日粮中分别添加0.04%、0.08%、0.12%NCG。母猪妊娠第110天采血分离血浆用于测定血浆游离氨基酸、一氧化氮(NO)、一氧化氮合酶(NOS)、激素含量和血液生化指标。
母猪妊娠后期日粮中添加0.08%NCG比空白对照组窝产活仔数提高11.75%(10.75 vs.9.62,0.05<P<0.1),窝产活仔总重提高13.23%(16.52 kg vs.14.59 kg,P<0.05),窝产死胎数降低57.14%(0.75 vs.1.75,P<0.05),降低了血浆尿素氮含量(P<0.05),同时提高了血浆精氨酸、NO、生长激素、锌离子浓度(P<0.05)。日粮中添加0.04%和0.12% NCG也改善了母猪部分繁殖性能。
上述结果表明:母猪妊娠后期日粮中添加NCG提高了母猪的繁殖性能;其作用机制可能是NCG有效提高了母猪内源精氨酸的合成,改善了母猪子宫内环境和胎猪营养供给,保证了胎猪的存活和生长。
2、妊娠后期日粮中添加NCG或L-精氨酸对母猪繁殖性能以及脐静脉VEGF-A、eNOS、miRNAs表达的影响
选取27头妊娠90天的长大母猪随机分成3组,对照组饲喂基础日粮,日粮中分别添加1.0% L-Arg或者0.1% NCG。母猪妊娠第110天上午饲喂后2h采集血液用于检测血液生化指标、游离氨基酸含量、激素含量、血管内皮生长因子(VEGF)及内皮型一氧化氮合酶(eNOS)含量。产后采集体重分别约为2.0kg(超大)、1.5kg(正常)、0.6kg(宫内发育迟缓,IUGR)的仔猪脐静脉组织用于real-time PCR检测VEGF-A、eNOS和miR-15b、miR-16、miR-221、miR-222表达量。
Arg和NCG均提高了母猪的繁殖性能,提高了血浆精氨酸和生长激素含量(P<0.05),降低了血浆VEGF和eNOS含量(P<0.05)。与对照组比,NCG组提高了miR-15b在脐静脉的表达量(P<0.05);与正常仔猪和IUGR仔猪相比,超大仔猪脐静脉miR-222表达量有提高的趋势(0.05<P<0.1),VEGF-A基因表达量显著增加(P<0.05);与精氨酸组和对照组相比,NCG组提高了VEGF-A基因表达量(P<0.05);与对照组相比,Arg和NCG降低了eNOS表达量(P<0.05)。
母猪妊娠后期日粮中添加Arg或NCG提高了母猪的生产性能,提高了日粮营养物质的利用效率。精氨酸或NCG可能通过影响胎猪脐静脉和/或胎盘miRNA-15b、miRNA-222的表达,调控其各自的靶基因(VEGF-A、eNOS)的基因表达量,从而调节脐静脉和胎盘的血管生成、发育和功能,通过脐静脉和胎盘从母体提供更多的养分给胎儿,保证胎儿的存活、生长和发育。
综上所述,母猪日粮中添加NCG能够提高母猪繁殖性能。其可能的机制是NCG促进内源精氨酸的合成,NCG和/或精氨酸通过影响microRNAs调控基因表达(VEGF-A、eNOS)调节血管功能,提高母体营养物质利用。