论文部分内容阅读
目的： 1.研究p16/Ki-67和p16/mcm2免疫细胞化学双染在宫颈病变中的表达及其与高危HPV感染的关联，并探讨其在宫颈癌筛查中的应用价值。 2.比较这两种标志物在宫颈癌筛查中应用于HPV阳性妇女分流的效果。 方法： 收集2015年至2016年在中国医学科学院肿瘤医院(CICAMS)进行的2项前瞻性研究的细胞标本，采用之江HPV试剂盒和罗氏cobas4800HPV试剂盒进行HPV DNA检测，所有标本完成薄层液基细胞学检查。将筛查阳性者进行阴道镜检查和病理活检。分别采用p16/Ki-67试剂盒和p16/mcm2抗体混合物对留存标本进行免疫细胞化学双染检测。利用基线数据分析p16/Ki-67、p16/mcm2表达与高危型HPV感染的关联。以病理结果为金标准，评价这两种标志物在总人群和HPV DNA阳性人群中对宫颈癌前病变的检出能力。 结果： 1.p16/Ki-67表达与高危HPV感染关系分析:p16/Ki-67在HPV阳性人群的表达高于HPV阴性人群（x2=95.98，P＜0.001），阳性率分别为37.1％(122/329)和8.9％(43/483)。根据HPV感染型别将HPV阳性者细分为HPV16/18型和非HPV16/18型，相应的p16/Ki-67阳性率分别为34.5％(26/51)和51.0％(96/278)。同高危HPV阴性相比，p16/Ki-67在HPV16/18型别表达的风险(OR=10.7，95％CI:5.6-20.1)近2倍于非HPV16/18型别(OR=5.4，95％CI:3.6-8.1)。 2.p16/mcm2表达与高危HPV感染关系分析:同HPV阴性组相比，p16/mcm2在HPV阳性人群的表达风险增加(OR=11.5，95％CI:8.2-16.1)。p16/mcm2阳性率在HPV阴性组、其他12种HR-HPV组、HPV16/18组分别为9.8％(53/540)、53.4％(188/352)和63.4％(59/93)。同高危HPV阴性相比，p16/mcm2在HPV16/18型别表达的风险(OR=16.0，95％CI:9.6-26.5)是其他高危型HPV(OR=10.5,95％CI:7.4-15.0)的1.5倍。 3.p16/Ki-67对CIN2+和CIN3+的检出能力:p16/Ki-67阳性率在病理确诊的宫颈炎、CIN1、CIN2、CIN3、宫颈鳞癌中分别为28.2％(51/181)、44.1％(15/34)、81.8％(9/11)、93.3％(14/15)、100％(2/2)，经线性趋势检验，其阳性率随病理诊断级别的升高而增强（x2=38.57，P＜0.001）;p16/Ki-67检出CIN2+和CIN3+的灵敏度分别为89.3％和94.1％，特异度分别为69.3％和66.8％;液基细胞学检查在CIN2+和CIN3+的灵敏度分别为60.7％和64.7％，特异度分别为49.3％和49.1％。 4.p16/mcm2对CIN2+和CIN3+的检出能力:p16/mcm2在宫颈炎、CIN1、CIN2、CIN3的阳性率分别为53.3％(106/199)、57.1％(24/42)、77.8％(14/18)、92.0％(23/25)，趋势性检验显示其阳性率随病理诊断级别的升高而升高(x2=15.4，P＜0.001);在总人群中，p16/mcm2检出CIN2+和CIN3+的灵敏度分别为86.1％和92.0％，特异度分别为46.1％和44.4％;在细胞学诊断为NILM人群中，p16/mcm2检出CIN2+和CIN3+的灵敏度分别为75.0％和100％，特异度分别为46.4％和46.6％;在细胞学诊断为ASC和LSIL人群中，p16/mcm2检出CIN2+和CIN3+的灵敏度分别为85.7％和87.5％，特异度分别为45.5％和44.1％，转诊率为53.8％。 5.p16/Ki-67和p16/mcm2在HPV阳性人群中对CIN2+和CIN3+的检出能力:在病理正常、CIN1、CIN2、CIN3和SCC中，p16/Ki-67阳性率分别为34.4％(41/119)、46.2％(12/26)、87.5％(7/8)、92.9％(13/14)和100％(2/2);p16/mcm2阳性率分别为56.3％(67/119)、65.4％(17/26)、75.0％(6/8)、92.9％(13/14)和100％(2/2)。两标志物阳性率均随病理诊断级别的升高而升高(P＜0.001)。在所有HPV阳性人群中，p16/Ki-67检测CIN2+和CIN3+的灵敏度为91.7％和93.8％，特异度为63.5％和60.8％，转诊率为36.2％;p16/mcm2检测CIN2+和CIN3+的灵敏度为87.5％和93.8％，特异度为42.1％和41.2％，转诊率为58.4％。在HPV阳性且细胞学NILM人群中，p16/Ki-67检测CIN2+和CIN3+的灵敏度为90.9％和100％，特异度为71.7％和69.4％;p16/mcm2检测CIN2+和CIN3+的灵敏度为81.8％和100％，特异度为46.2％和46.0％。 结论： 1.p16/Ki-67、p16/mcm2表达与高危HPV感染，尤其是HPV16/18型别具有很强的关联性，鉴于高危HPV持续感染与宫颈癌前病变的关系，p16/Ki-67和p16/mcm2检测可考虑作为宫颈癌筛查的潜在分子标志物。 2.p16/Ki-67检测灵敏度高于细胞学检查，特异度与之相似，能有效识别宫颈高度病变和指导CIN的分级;p16/Ki-67双染制片重现性较好，阅片不依赖于细胞形态学，普通技术人员经短期培训即可掌握，可考虑作为液基细胞学的替代方法用于宫颈癌筛查。p16/mcm2灵敏度较高，但特异度有限，能在细胞学正常人群中分拣出宫颈癌前病变患者，同时可用作ASC和LSIL人群的分流方法并有效降低阴道镜转诊率。 3.在HPV阳性妇女中，p16/Ki-67灵敏度与p16/mcm2相似，但其特异度更高，并在更大程度上降低阴道镜转诊率。因此，p16/Ki-67是一种有应用前景的HPV分流标志物，非常适用于中国医疗资源缺乏，细胞学筛查体系不健全的广大农村地区。