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目的系统性红斑狼疮是一种复杂的自身免疫病,B细胞过度分化产生抗体是系统性红斑狼疮的主要发病机制。miRNAs在系统性红斑狼疮发病机制中的作用日益显著。本研究探索miR-326表达改变对MRL/lpr狼疮模型鼠脾脏B细胞分化及自身抗体产生的影响。方法将30只8周龄雌性MRL/lpr狼疮鼠分为3组,分别标记为:LV-326组,LV-sponge组和LV-ctrl组,每组10只。13周龄时通过鼠尾静脉注射慢病毒载体改变小鼠体内miR-326的表达。LV-326组注射miR-326慢病毒载体增加小鼠miR-326表达,LV-sponge组注射miR-326抑制病毒抑制miR-326活性,LV-ctrl注射空病毒作为对照。注射病毒前取小鼠内眦静脉血100μL,注射病毒后7天取小鼠脾脏,肾脏和外周血100μL进行试验。qRT-PCR检测脾CD19~+B细胞中Ets-1及miR-326表达;流式细胞术检测脾CD19~+B细胞中CD19~+CD138~+浆母细胞比率;ELISA法检测血清中IgG型抗双链DNA(anti-dsDNA)抗体水平;CBA法检测血清中B细胞相关细胞因子(IL-10、IL-6和TNF)水平;免疫组化检测肾脏中IgG和IgM沉积及肾脏损害情况。SPSS软件用于分析数据,P>0.05差异有统计学意义。结果① qRT-PCR结果显示LV-326组小鼠脾脏CD19~+B细胞中miR-326水平显著高于LV-sponge组和LV-ctrl组,LV-326组小鼠脾脏CD19~+B细胞中Ets-1水平显著低于LV-sponge组,小鼠脾脏CD19~+B细胞中miR-326水平与Ets-1水平呈显著负相关。②流式细胞术结果显示LV-326组小鼠脾脏CD19~+B细胞中CD19~+CD138~+浆母细胞比率显著高于LV-sponge组和LV-ctrl组,LV-sponge组和LV-ctrl组之间未见显著差异。③对注射病毒前后的小鼠血清中IgG型抗-dsDNA抗体表达水平进行比较发现,注射miR-326慢病毒载体可显著增加小鼠血清IgG型抗-dsDNA抗体水平;反之,注射miR-326抑制病毒减少血清IgG型抗-dsDNA抗体水平;对注射病毒后3组间的血清中IgG型抗-dsDNA抗体比较发现LV-326组小鼠血清IgG型抗-dsDNA抗体水平显著高于LV-sponge组和LV-ctrl组,LV-sponge组和LV-ctrl组之间未见显著差异。④对注射病毒前后的小鼠血清中细胞因子的水平进行比较后发现,注射miR-326慢病毒载体可显著增加小鼠血清IL-10和IL-6水平,注射miR-326抑制病毒可减少血清IL-6水平,小鼠血清TNF水平未发生显著变化。对注射病毒后三组小鼠间的细胞因子水平进行比较发现,LV-326组小鼠血清IL-6水平显著高于LV-sponge组和LV-ctrl组。三组间血清IL-10和TNF水平未见显著差异。⑤免疫组化标记肾小球免疫复合物沉积情况显示:LV-326组小鼠肾小球IgG、IgG1和IgM沉积显著多于LV-sponge组和LV-ctrl组,LV-sponge组小鼠肾小球IgG、IgG1和IgM沉积显著少于LV-ctrl组。除此之外,LV-326组小鼠肾小球损伤较LV-sponge组和LV-ctrl组明显。结论研究结果显示miR-326过表达可通过抑制Ets-1表达促进狼疮鼠脾脏B细胞分化,自身抗体产生,肾脏免疫复合物沉积和肾小球损害。提示miR-326抑制Ets-1表达参与狼疮鼠B细胞分化及抗体产生机制,该机制可能在系统性红斑狼疮发病机制中发挥重要作用。