猪繁殖与呼吸综合征是严重危害养猪业的一种高度接触性传染性疾病。该病最早是由美国学者和荷兰学者分别于1987年、1990年发现的。猪繁殖与呼吸综合征的主要临床症状是引起母猪妊娠早期的流产等母猪繁殖障碍；引起仔猪和较大育肥猪的呼吸系统疾病以及高死亡率。作为猪繁殖与呼吸综合征的病原PRRSV为单股正链RNA病毒，属于动脉炎病毒科。PRRSV感染猪后可以诱导强烈的体液免疫，但是最早产生的抗体不但不能阻止病毒的感染，反而通过抗体依赖性增强作用(ADE)增强了病毒的复制。ADE作用是该病防控中的最大难题之一。研究发现，亚中和水平的抗PRRSV血清和病毒混合物感染肺泡巨噬细胞时，病毒收获量显著提高；当病毒和稀释后的抗体混合感染时，病毒血症持续的时间比仅用正常血清处理的对照组更长。这些研究结果说明，PRRSV可以通过自然感染或疫苗免疫产生的低水平抗体介导的ADE增加对机体的易感性，从而加重疾病的严重程度。保护性抗体是研制有效PRRSV疫苗的基础，ADE现象给PRRSV疫苗的研制造成了巨大的阻碍，也给兽医免疫学的研究带来了巨大的挑战。关于PRRSVADE致病机制的研究仍不是十分清楚。前期的研究结果表明，PRRSV通过FcγR介导进入巨噬细胞是其重要的致病机制。作者课题组前期研究结果表明，猪FcγRIIb可以介导PRRSV的ADE作用。FcγRIIb是目前发现的唯一的抑制性受体。FcγRIIb被免疫复合物激活后可以通过其胞内区ITIM基序募集SHIP-1分子而阻止免疫细胞的活化信号。猪FcγRIIb介导PRRSV的ADE作用有可能是通过FcγRIIb胞内的抑制性信号传导来实现的。本实验利用荧光定量PCR研究PRRSVADE途径感染PAM后，免疫相关分子的表达差异发现，PRRSV ADE途径感染能显著抑制TNF-α、IFN-β的转录，NF-κB、IRF-1及IRF-3的转录也明显受到抑制。这些实验结果表明，PRRSV ADE感染PAM感染率增加的原因可能是由于ADE途径感染通过抑制NF-κB、IRF-1及IRF-3的转录和影响NF-κB的核转移从而抑制TNF-α、IFN-β等抗病毒分子的转录。目前，关于猪FcγRIIb胞内信号传导在介导ADE作用的具体机制仍不是十分清楚。本实验从FcγR介导的胞内信号传导通路出发，研究猪FcγRIIb胞内保守序列及其介导的信号传导在介导PRRSVADE感染中的作用。实验通过构建稳定表达胞内区突变的猪FcγIIb的Marc-145细胞系，来研究突变的猪FcγIIb和野生型猪FcγIIb在介导PRRSVADE感染中的作用。结果表明，当猪FcγIIb胞内区缺失或者其胞内区ITIM基序突变后，猪FcγIIb介导PRRSV ADE感染的能力也随之丧失。本实验的研究结果说明猪FcγIIb胞内区及其ITIM基序在介导PRRSV ADE感染过程中起重要作用。为了进一步研究猪FcγIIb胞内信号传导与PRRSV ADE的关系，通过干扰ITIM基序信号传导途径中的关键分子SHIP-1的表达，研究ITIM基序介导的信号传导在PRRSV ADE途径感染中的作用。研究发现，SHIP-1沉默后影响PRRSVADE感染导致的IFN-β转录抑制及病毒复制的增加。结果说明猪FcγIIb胞内区的ITIM基序募集SHIP-1在PRRSVADE感染过程中起重要作用。本实验结果初步探索了PRRSVADE感染的分子机制，为进一步研究FcγR介导ADE作用的具体机制提供新的思路，为研究PRRSVADE感染的致病机制提供了新的方向。