在生物研究领域,蛋白质表达是一个非常重要内容,研究者往往希望目的蛋白能够有很高效率的表达,从而获得更多目的蛋白,以达到研究的目的。但是,人们总会遇到一些难题,蛋白质很难有效表达,或者表达量达不到要求,因此尝试用各种方法解决上述难题,基于这样的目的,本文在方法学上对实现蛋白质更高更有效表达途径进行探索,基本思路是,通过提高基因拷贝数,来提高目的蛋白表达量,为某些蛋白质表达提供一种可行的表达方式或途径。生物砖组装技术是近几年发展起来的一种快速、高效装配技术,本实验采用生物砖的原理,快速构建多拷贝甘露聚糖酶基因原核表达生物砖载体(pBAD/His-man),然后在大肠杆菌BL21(DE3)中表达,比较在相同的外部条件下,不同拷贝数基因之间蛋白表达量的差异,通过分析这种差异,初步探究基因拷贝数与蛋白表达量之间存在的某种联系。由于原核基因表达本身存在很强的内源调控,因此还需要在诱导剂浓度和诱导时间上进行摸索,消除蛋白饱和表达对实验结果产生强烈的偏差。本实验成功构建了1至6拷贝甘露聚糖酶基因原核表达生物砖载体pBAD/His-man,经过了多次重复实验,结果显示,在诱导时间为四小时时,2至6拷贝的转化子甘露聚糖酶平均表达量无明显差异,而比1拷贝的要高；诱导时间缩短为30分钟时,各拷贝数转化子表达量差异显著,但哪一种拷贝数的表达量最高,还不能确定,主要因为高表达稳定性太差。但是总的来讲,增加拷贝数确实可以一定程度的提高蛋白表达量。