前言 目前研究发现,端粒酶活性在大多数永生细胞及肿瘤细胞中表达增强,与肿瘤的发生有着密切的关系。端粒酶由端粒酶逆转录酶(human telomerase reverse transcriptase,hTERT)、端粒RNA(telomerase RNA)和端粒相关蛋白1(TP1)组成。其中hTERT是调控端粒酶活性和端粒长度的主要因素,在细胞永生化和恶性转化中起关键作用。hTERT的功能受诸多因素的影响,MKRN1(Makorin RING finger protein 1,MKRN1)基因的编码产物是hTERT降解过程中的关键酶,MKRN1基因的过表达可促进hTERT的降解,降低端粒酶的活性和端粒的长度。热休克蛋白90(heat shock protein 90,HSP90)能够与hTERT结合并促进其活性,使端粒增长,抑制Hsp90的功能将促进端粒酶降解。在正常细胞中MKRN1和HSP90基因的表达保持动态平衡,端粒酶活性和端粒长度受这一平衡的调节。目前MKRN1和HSP90基因与肿瘤发生的相关性,以及二者相互作用还不十分清楚。因此,本实验检测MKRN1和HSP90基因在喉鳞状细胞癌(以下简称喉癌)组织及癌旁正常对照组织中的表达,以探讨MKRN1和HSP90基因的相关性及二者在喉癌发生发展中的作用。 实验方法 1.材料 1.1 35例喉癌组织标本来源于中国医科大学附属第一临床学院耳鼻喉科手术切取标本。术前未经化疗或放疗,术后经病理证实均为鳞状细胞癌。 1.2 总RNA提取相关试剂。 1.3 RT-PCR相关试剂。