口蹄疫病毒在猪体内的定位研究

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亲和素-生物素系统(Avidim -Biotin system,ABS)已广泛用于免疫标记检测技术。本研究利用生物素标记抗FMDV IgG,建立了简单、快速、特异、敏感的检查组织材料中FMDV的ABC免疫组化染色方法。在国内首次用全序列已知的原始毒株O/Akesu/58接种乳鼠和猪,定期采样,制作石蜡切片,进行常规染色、间接酶标抗体法染色和ABC组化染色,观察组织病理学变化及检测 FMDV结构蛋白抗原和病毒相关抗原(VIA)。结果表明,接种FMDV的乳鼠骨骼肌呈现典型的凝固性坏死变化,间接酶标抗体法和ABC法染色都可以成功地检测肌纤维细胞质中的病毒粒子。 病猪组织病理变化主要表现在皮肤和皮肤粘膜的棘层细胞肿大,随着病程发展,肿大的棘细胞发生溶解性坏死和直至完全溶解。通过常规染色发现,细胞核浓缩深染或淡染,甚至消失。结构蛋白抗原和VIA抗原检测表明上皮组织似乎更适合FMDV增值,接种7天后,在上皮组织的棘细胞层或多或少有病毒颗粒出现。淋巴组织中FMDV主要存在于淋巴小结。软腭、咽、腭扁桃体、肺和肺门淋巴结在7、14天时出现阳性颗粒,而到28天后,不再出现阳性颗粒。腭扁桃体中阳性染色最为显著,吻突、舌背面、口腔粘膜、食管起始部、蹄叉、蹄冠和眼睑仅在接种7天能检测到少量的病毒粒子。肺组织中的病毒主要存在于肺泡巨噬细胞和肺泡膈。心肌、肝、脾、肾、乳腺和胸头肌没有出现阳性染色。发病猪在前14天存在带毒现象,而在28天后,没有检测到病毒,说明猪不存在持续带毒现象。此外,本实验还证实,ABC组化染色是检测FMDV和研究发病机理一种比较有应用前景的方法。
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