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目的:研究中药复方制剂活血通脉颗粒对兔颈动脉粥样硬化(Carotid Arteriosclerosis,CAS)的病理组织结构、血脂TC、TG、HDL-C、LDL-C测定、白介素-6(IL-6)、细胞间黏附分子-1(ICAM-1)、单核细胞趋化蛋白-1(MCP-1)及核转录因子(NF-κB)表达干预作用,并以TLR4细胞信号转导通路为切入点,探讨活血通脉颗粒干预兔颈动脉粥样硬化模型颈动脉斑块及对炎症因子表达的影响。方法:1.造模与分组:75只新西兰白兔,随机抽取10只为空白组,其余65只采用高脂饲料喂养(78%基础饲料中加入7%猪油,14%蛋黄粉,1%胆固醇)建立颈动脉粥样硬化模型。11周造模成功后将其随机分为模型组、自然消退组、活血通脉颗粒低、中、高剂量组、辛伐他汀组6组,每组7只。2.给药治疗:自然消退组,中药低、中、高剂量组,辛伐他汀组5组饲养基础饲料,活血通脉颗粒低剂量组生药5.5g/kg每天灌胃给药,活血通脉颗粒中剂量组生药11g/kg每天灌胃给药,活血通脉颗粒高剂量组生药22g/kg每天灌胃给药,辛伐他汀组(1.87mg/1kg)灌胃,自然消退组进行等体积蒸馏水灌胃,连续灌胃5周。3.检测指标:分别在实验第11周、第16周用全自动生化分析仪测定总胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)、高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C);采集颈动脉标本,常规石蜡包埋切片,HE染色。光镜下观察组织的病理改变;采用SABC法检测动脉粥样硬化斑块中TLR4所占百分比的表达;采用ELISA法检测兔血清ICAM-1、IL-6水平;采用实时荧光定量PCR方法检测TLR4、NF-κB、MCP-1m RNA表达。结果:(1)血脂指标检测:在实验第11周,模型组TC、TG、LDL-C与空白组比较均有明显升高(P<0.01)。给药5周后,与自然消退组比较,活血通脉颗粒低、中、高剂量组TC、TG、LDL-C和辛伐他汀组相比均明显下降(P<0.05);与活血通脉颗粒低剂量组比较,活血通脉颗粒中、高剂量组TC、TG、LDL-C与辛伐他汀组相比TC、TG、LDL-C组明显下降(P<0.05);活血通脉颗粒高剂量组TC、TG、LDL-C与普通饲料辛伐他汀比较无统计学意义(P>0.05)。(2)病理观察:空白组颈动脉内皮光滑,未见斑块和脂质沉积,模型组内皮明显增生,斑块内含有大量泡沫细胞,粥样斑块分布广泛。活血通脉颗粒低、中、高剂量组较模型组内皮增生程度明显减轻,斑块内含较少泡沫细胞。活血通脉颗粒高剂量组整个动脉管壁层次尚清晰。(3)TLR4免疫组化染色:光镜下,模型组比空白组细胞浆/细胞膜出现大量的棕黄色沉着,提示TLR4有强阳性表达。模型组TLR4表达比空白组明显升高(P<0.01)治疗后各组TLR4表达与自然消退组明显下降(P<0.01)。(4)应用ELISA方法检测:与自然消退组比较,活血通脉颗粒中、高剂量组家兔血清中ICAM-1、IL-6水平表达明显下降(P<0.05),与活血通脉颗粒低剂量比较,活血通脉颗粒高剂量组、辛伐他汀组家兔血清中ICAM-1、IL-6水平表达明显下降(P<0.05)。(5)应用荧光定量PCR检测:治疗后各组TLR4、NF-κB、MCP-1m RNA表达低于自然消退组(P<0.05)。结论:活血通脉颗粒能降低TC、TG及LDL-C,可能通过抑制ICAM-1、IL-6表达水平从而干预家兔动脉粥样硬化的形成。活血通脉颗粒益气化痰,活血通脉法对CAS斑块的抑制作用。通过药量递增从而起到加强延迟斑块形成、稳定斑块、更好达到治疗CAS的目的。活血通脉颗粒可能通过TLR4信号通路干预CAS模型兔斑块形成的影响及对炎症因子表达的抑制作用。-1