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新城疫(Newcastle disease，ND)是危害世界养禽业的重大烈性传染病。由新城疫病毒(Newcastle disease virus，NDV)引起，NDV为单股负链RNA病毒，属于副黏病毒科(Paramyxoviridae)、禽副黏病毒属(Avulavirus)。NDV基因组全长15kb，其基因组编码的蛋白包括核蛋白(nucleoprotein.NP)，磷蛋白(phosphoprotein，P)，基质蛋白(matrix protein，M)，融合蛋白(fusion proteins，F)，血凝素一神经氨酸酶蛋白(hemagglutinin-neuraminidase，HN)和大聚合酶蛋白(RNA-dependentRNA polymerase or 1arge polymerase，L)六个独立转录编码单元。
人们对新城疫病毒致病性的研究主要集中在F蛋白和HN蛋白的致病力上，认为F蛋白的裂解位点的氨基酸序列是新城疫病毒致病性的主要决定因素。NDV的HN蛋白是一个多功能蛋白，NDV的HN基因在病毒的感染过程中扮演着重要角色，但是HN基因对致病性的确切作用还不十分明确。HN蛋白具有血凝素(HA)和神经氨酸酶(NA)两种活性。识别细胞表面的唾液酸的受体并促进F蛋白的融合作用。因此，HN蛋白在病毒的感染过程中扮演着重要的角色。
本研究在成功重组新城疫Lasota的基础上，利用反向遗传操作技术，将强毒株F48E9、HB38的HN基因替换rLasota的HN基因。提取F48E9、HB38基因组RNA，利用引物经RT-PCR获得其HN基因的PCR产物。连接pBluscriptⅡKS(+/-)载体多克隆位点上，测序正确后，利用特定的MunI和Spe I酶切位点酶切得HN基因片段。构建全长质粒，进行转染，收获病毒rL-F48E9HN、rL-HB38HN。拯救病毒rL-F48E9HN、rL-HB38HN的F3代，收获病毒阳性尿囊液提取病毒基因组RNA，进行RT-PCR及序列分析。
嵌合病毒rL-F48E9HN、rL-HB38HN在鸡胚内的生长特性与亲本株Lasota一致，与F48E9、HB38的生长特性相差甚远。通过分析是否HN蛋白的来源对于NDV的生物学活性有一定的影响，以及亲本毒株及嵌合病毒红细胞吸附性和融合作用。结果表明：嵌合病毒红细胞吸附性明显增强，rL-F48E9HN、rL-HB38HN分别增加51％、62％，而融合作用无明显变化。嵌合病毒对鸡及鸡胚的致病性研究表明：rL-F48E9HN、rL-HB38HN的MDT分别为148h、120h，ICPI分别为0.43、0.64；IVPI均为0。说明嵌合病毒rL-F48E9HN、rL-HB38HN的致病指标有微弱的增强，但是并没有达到强毒力水平，仍属于弱毒株。结果也表明NDV的致病性是多基因作用的结果，F蛋白的裂解位点并不是NDV毒力的唯一决定因素。