FoXO3a通路调控失神经肌萎缩的作用机制及银杏叶提取物的治疗作用

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目的:观察银杏叶提取物(EGB761)在实验性大鼠失神经肌萎缩中的治疗效果,探讨银杏叶提取物对大鼠腓肠肌细胞中FoxO3a/MAFbx信号通路的影响。方法:选用成年雌性Wistar大鼠54只,体重200±10g,每组六只,随机分为3组即失神经组(A组,24只),药物干预组(B组,24只)和正常对照组(C组,6只)。A组和B组大鼠应用10%水合氯醛(2ml/Kg体重)行腹腔内注射麻醉,取其下肢股后侧切口暴露双侧坐骨神经,左侧行假手术,右侧于距梨状肌下孔lcm处,切断坐骨神经约0.7cm-1.0cm,近端翻转180°于周围组织进行缝合,造成右下肢腓肠肌失神经支配模型。药物干预组每日银杏叶提取物(100mg/Kg体重)灌胃,在失神经第2、7、14、28天分别处死大鼠取其两侧腓肠肌,分别称肌肉湿重后快速置于-80℃冰箱冻存,备用。正常对照组C组不做任何处理,手术当天(术后6小时)麻醉下分离双侧腓肠肌,记为术后第0天。分别求出肌湿重比;以WEST BLOT检测右腓肠肌标本中p-FoxO3aS253, FoxO3a, MAFbx蛋白的表达量;RT-PCR检测FoxO3a,, MAFbXmRNA的表达量。采用SPSS13.0统计软件处理各组数据,实验数据以均数±标准差表示,各组之间的差异用One-way ANOVA分析,组间比较用t检验,p<0.05差异具有统计学意义结果:本研究证实大鼠腓肠肌失神经支配后肌湿重比下降,银杏叶提取物灌胃治疗后,与正常对照组比较,肌湿重比虽降低,但药物干预组各组肌湿重比高于相同时间点失神经组,差异具有统计学意义(p<0.05)。药物干预组FoxO3a基因表达和蛋白表达较失神经组减少,在7,14,28天差异具有统计学意义(p<0.05)。药物干预后p-FoxO3aS253的磷酸化水平显著高于同期失神经组。药物干预组MAFbx基因和蛋白表达较失神经组下降,在第7、14、28天差异具有统计学意义(p<0.05)。结论:大鼠失神经骨骼肌萎缩早期,银杏叶提取物可能是通过FoxO3a通路来防治失神经早期的骨骼肌萎缩。
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