卵母细胞和胚胎玻璃化冷冻技术是辅助生殖技术的重要组成部分，其广泛应用于优良家畜、珍稀和濒危动物的保种和人类不孕不育症的治疗等领域。随着科研人员的不断努力，玻璃化冷冻技术日趋成熟，应用也越来越普遍。但是，近年来的研究发现，玻璃化冷冻不仅对其细胞超微结构以及细胞膜等造成不良影响，还对其卵母细胞或者胚胎DNA甲基化水平、发育基因的表达、DNA损伤和印记基因等产生影响，对胚胎发育以及后代存在潜在风险。本研究使用卵母细胞单细胞凝胶电泳、免疫荧光染色、qRT-PCR和TUNEL染色等方法，分析了卵母细胞玻璃化冷冻对MⅡ期卵母细胞及胚胎DNA损伤的影响;同时使用qRT-PCR和亚硫酸氢盐测序法，检测了卵母细胞玻璃化冷冻对MⅡ期卵母细胞及受精后代印记基因H19和Gtl2差异甲基化区域(DMRs) DNA甲基化状态及表达的影响。获得了如下研究结果:　　1、卵母细胞单细胞凝胶电泳实验研究表明，冷冻组和对照组的尾部DNA和OTM值差异不显著;免疫荧光染色显示，冷冻组和对照组MⅡ期卵母细胞中γ H2AX水平差异不显著，而5hmC水平显著升高;冷冻卵母细胞激活发育到2-cell，冷冻组的γ H2AX位点数与对照组比较显著升高(P＜0.05)，5hmC水平也显著升高(P＜0.05);在MⅡ期卵母细胞中，53BP1、Casp3、Fas、Gadd45a和Ddit3中表达水平差异不显著;在2-cell中，Casp3和Fas的表达水平变化差异不显著，53BP1、Gadd45a和Ddit3表达水平显著升高(P＜0.05);冷冻组卵母细胞孤雌激活后卵裂率和囊胚率显著降低(P＜0.05)，囊胚凋亡细胞数显著上升(P＜0.05)。　　2、在MⅡ期卵母细胞中，冷冻组和对照组的H19甲基化状态没有显著差异(P＞0.05)，冷冻组Gtl2差异甲基化区域的平均甲基化水平(5.83％)显著低于对照组(9.22％)(P＜0.05);冷冻后卵母细胞印记基因H19的表达水平无显著变化(P＞0.05)，而GTl2表达水平显著下降;在冷冻卵母细胞体外受精和胚胎移植后，对获得的性成熟仔鼠的心脏、脾脏、肺脏和肾脏进行检测，发现Gtl2差异甲基化区域DNA甲基化水平与对照差异不显著(P＞0.05)，肝脏检测发现，冷冻组Gtl2差异甲基化区域DNA甲基化水平显著高于对照组(P＜0.05);实时定量的结果显示，在脾脏和肾脏中Gtl2表达水平变化不明显(P＞0.05)，心脏、肝脏和肺脏中Gtl2表达水平显著上升(P＜0.05)。　　结论:MⅡ期卵母细胞玻璃化冷冻-解冻后，未检测到明显的DNA损伤，但是冷冻卵母细胞发育到2-cell期，可以检测到DNA损伤的发生，并且检测发现53BP1、Gadd45a和Ddit3表达上调。卵母细胞玻璃化冷冻后早期胚胎发育卵裂率和囊胚率降低，囊胚凋亡细胞数上升。卵母细胞玻璃化冷冻会影响MⅡ期卵母细胞印记基因Gtl2的表达和差异甲基化区域DNA甲基化水平，也会对获得的仔鼠器官中印记基因Gtl2的表达和差异甲基化区域DNA甲基化水平造成影响。