【摘 要】
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本实验对鸡肉中沙门氏菌的可培养状态及非可培养状态的检测进行了研究。通过采用改良的传统国标方法对天津市零售鸡肉中肠炎沙门氏菌的污染情况与耐药情况进行了调查与分析。从2015年11月至2016年10月,在天津的9个主要行政区中的共29个超级市场和10个农贸市场中共采集了 620份鸡肉样品,包括鸡中翅(n=139)、鸡翅根(n=142)、鸡腿(n=136)、鸡胸(n=144)和59份鸡内脏,鸡内脏包含了
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本实验对鸡肉中沙门氏菌的可培养状态及非可培养状态的检测进行了研究。通过采用改良的传统国标方法对天津市零售鸡肉中肠炎沙门氏菌的污染情况与耐药情况进行了调查与分析。从2015年11月至2016年10月,在天津的9个主要行政区中的共29个超级市场和10个农贸市场中共采集了 620份鸡肉样品,包括鸡中翅(n=139)、鸡翅根(n=142)、鸡腿(n=136)、鸡胸(n=144)和59份鸡内脏,鸡内脏包含了鸡心(n=25)、鸡肝(n=22)和鸡胗(n=12)。620份样品中,240份(38.71%)样品检测为肠炎沙门氏菌阳性。菜市场的污染率(45.33%)高于超市的污染率(34.94%),散装鸡肉的污染率(39.41%)高于盒装鸡肉的污染率(33.77%),不同部位中,鸡内脏的污染率最高(59.32%),其次为鸡翅根(42.25%)、鸡胸(40.28%)、鸡中翅(33.81%)、鸡腿(29.41%)。将分离到的475株分离株进行抗生素耐药检测,本实验采用7类共13种抗生素。在这些分离株中,470(98.95%)株对至少一种抗生素耐药,另有5株分离株对所用的13种抗生素均敏感。本实验中细菌耐药率最高的抗生素是萘啶酮酸(97.89%),其次是氨苄西林(78.53%)、磺胺异恶唑(74.11%)、链霉素(64%)、四环素(42.95%)等。368株(44.47%)分离株为多重耐药菌,对3类及以上抗生素耐药。通过建立染料与实时定量环介导恒温扩增结合技术(PMA-qLAMP)来检测沙门氏菌的活着但非可培养状态(VBNC)。本实验所建立的PMA-qLAMP方法可以特异的、快速的定量出食品样品中沙门氏菌VBNC的含量。PMA-qLAMP的标准曲线方程为 y=-2.1003x+32.869(R2=0.968);PMA-qPCR 的标准曲线方程为 y=-3.2836x+33.97(R2=0.995),通过Ct值对Tt值的线性拟合,用传统的PMA-qPCR方法证明了本研究所建立的PMA-qLAMP技术与其具有高度线性正相关性(R2=0.978)。在对建立的鸡肉样品染菌模型进行检测时,检测限为101 CFU/g,鸡肉基质对PMA-qLAMP技术扩增无影响。
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