【摘 要】
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盐胁迫在自然界中广泛存在,影响作物生长发育,导致农作物减产。植物在长期适应环境的过程中,进化出了复杂的信号网络。随着遗传学、基因工程和分子生物学的发展,人们围绕植物耐盐机理展开了深入研究。钙是植物生长发育的重要调节剂,钙离子(Ca2+)是植物细胞的第二信使。Ca2+感受器钙调磷酸酶B类蛋白(Calcineurin B-like protein,CBL)感知钙信号,传递给靶蛋白CBL互作蛋白激酶(C
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盐胁迫在自然界中广泛存在,影响作物生长发育,导致农作物减产。植物在长期适应环境的过程中,进化出了复杂的信号网络。随着遗传学、基因工程和分子生物学的发展,人们围绕植物耐盐机理展开了深入研究。钙是植物生长发育的重要调节剂,钙离子(Ca2+)是植物细胞的第二信使。Ca2+感受器钙调磷酸酶B类蛋白(Calcineurin B-like protein,CBL)感知钙信号,传递给靶蛋白CBL互作蛋白激酶(CBL-interacting protein kinase,CIPK)。本研究鉴定到一个拟南芥SOS2(Salt overly sensitive)的同源基因Zm CIPK24-2。Zm CIPK24-2基因的编码区为1356 bp,编码一个包含452氨基酸残基的蛋白。序列分析显示Zm CIPK24-2与SOS2和Zm CIPK24同源性较高,Zm CIPK24-2具有CIPK激酶家族的特征功能域。组织特异表达结果显示Zm CIPK24-2基因在玉米各组织部位广泛表达,且在花粉中表达量最高。Zm CIPK24-2在玉米各组织表达模式存在差别,暗示其作用部位和功能机制不尽相同。胁迫表达结果显示Zm CIPK24-2受Na Cl胁迫后上调表达。在拟南芥sos2突变体中过表达Zm CIPK24-2,与拟南芥sos2突变体相比较,高盐浓度下Zm CIPK24-2转基因纯合株系的存活率提高,根长增长。亚细胞定位实验表明Zm CIPK24-2定位于细胞质、细胞膜与核膜。在植物中SOS途径的演化非常保守,CBL-CIPK复合体参与植物对盐胁迫的响应。为了探索Zm CIPK24-2的耐盐调控机理,构建诱饵质粒p DEST32-Zm CIPK24-2筛选玉米Zm CBLs中的互作蛋白。酵母双杂交实验和LUC互补成像实验证明Zm CIPK24-2分别与Zm CBL1、Zm CBL4、Zm CBL8和Zm CBL9互作且可以植物体内发生,说明Zm CIPK24-2的活性和功能可能是由这些Ca2+结合蛋白Zm CBLs调控的。综上,本研究鉴定了一个玉米耐盐基因Zm CIPK24-2。这些结果表明Zm CIPK24-2参与调控植物的生长发育、逆境胁迫晌应及信号传递,为研究玉米CIPK家族基因功能和解析玉米CBL-CIPK信号通路增添了新的实验证据。
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