论文部分内容阅读
目的:通过临床和实验研究,观察补肾活血方改善卵巢储备功能的临床疗效,探讨其调控线粒体SIRT3的机理。方法:临床研究:选择2018年1月至2020年1月间苏州市中医医院妇二科就诊的30例肾虚血瘀型卵巢储备功能低下患者,予中药补肾活血方治疗三个月经周期,比较其治疗前后血清性激素(FSH、LH、E2、FSH/LH)、窦卵泡计数(AFC)、卵巢直径(OVD)及中医证候积分的变化。实验研究:选择60只有正常动情周期的12周龄SD大鼠,随机分为空白组,模型组,补肾活血方低、中、高剂量组,阳性药物对照组,每组10只。除空白组外,其余5组每日上午予雷公藤多苷片灌胃造模,每日下午,中药治疗组分别予补肾活血方中药原液3.75g/kg、7.5g/kg、15g/kg灌胃,阳性药物对照组予辅酶Q10 100mg/kg灌胃,连续灌胃15天。比较大鼠动情周期,卵巢指数,检测大鼠卵巢线粒体SIRT3,凋亡相关蛋白 Bax、Bcl-2、Caspase-9、Caspase-3 表达及大鼠血清 FSH、E2、P、T、AMH 水平。结果:临床研究:①补肾活血方治疗后患者血清FSH水平较前显著降低,E2水平较前明显升高(P<0.05),LH治疗前后无显著差别(P>0.05)。②补肾活血方治疗后患者AFC、OVD较前显著增加(P<0.01)。③补肾活血方治疗后患者中医证候积分较前显著降低(P<0.01)。④补肾活血方临床有效率达90%。实验研究:①大鼠动情周期及卵巢指数:与空白组相比,模型组大鼠动情周期显著延长(P<0.05),卵巢指数显著降低(P<0.05);与模型组相比,补肾活血方高剂量组及辅酶Q10组大鼠动情周期显著缩短(P<0.05),卵巢指数明显增加(P<0.05);补肾活血方高剂量组大鼠动情周期、卵巢指数与辅酶Q10组之间无显著差异(P>0.05)。②大鼠卵巢线粒体SIRT3表达:与空白组相比,模型组大鼠卵巢线粒体SIRT3表达明显降低(P<0.05);与模型组相比,补肾活血方低、中、高剂量组及辅酶Q10组大鼠卵巢线粒体SIRT3表达显著升高(P<0.05);补肾活血方高剂量组与辅酶Q10组大鼠卵巢线粒体SIRT3表达无显著差异(P>0.05)。③大鼠卵巢组织凋亡蛋白Bax、Bcl-2、Caspase-9、Caspase-3表达:与空白组相比,模型组大鼠Bax、Caspase-9、Caspase-3蛋白表达显著增加,Bcl-2蛋白表达显著降低(P<0.05);与模型组相比,补肾活血方中、高剂量组及辅酶Q10组大鼠Bax、Caspase-9、Caspase-3蛋白表达明显降低(P<0.05),补肾活血方高剂量组及辅酶Q10组大鼠Bcl-2蛋白表达增加(P<0.05);补肾活血方高剂量组大鼠Bax、Bcl-2蛋白表达与辅酶Q10组无显著差异(P>0.05)。④大鼠血清FSH、E2、P、T、AMH:与空白组相比,模型组大鼠血清E2、P、AMH水平降低,血清FSH、T水平升高(P<0.05);与模型组相比,补肾活血方低、中、高剂量组及辅酶Q10组能显著降低大鼠血清FSH、T水平,升高血清E2、P水平(P<0.05);补肾活血方除低剂量组血清AMH与模型组无差别(P>0.05),补肾活血方中、高剂量组大鼠血清AMH水平均明显高于模型组(P<0.05)。补肾活血方高剂量组大鼠血清FSH、E2、P、T、AMH水平与辅酶Q10组无显著差异(P>0.05)。结论:1.补肾活血方能显著降低卵巢储备功能低下患者血清FSH、FSH/LH水平,升高E2水平,增加AFC个数和OVD大小,降低中医证候积分,有效调节女性生殖激素,改善卵巢功能。2.补肾活血方能上调模型组大鼠卵巢线粒体SIRT3表达,维持线粒体自身结构的稳定性及通透性,减少凋亡因子释放,上调模型组大鼠Bcl-2蛋白表达,下调Bax、Caspase-9、Caspase-3蛋白表达,抑制细胞凋亡,改善卵巢功能。3.补肾活血方能升高模型组大鼠血清E2、P、AMH水平,降低血清FSH、T水平,调节内分泌,改善卵巢功能。